EGFR酪氨酸蛋白激酶抑制剂的设计、合成及活性评价

表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)信号传导途径在多种肿瘤的发生发展过程中起着非常重要的作用，以EGFR作为药物作用的靶点，通过干预EGFR受体酪氨酸激酶信号传导进行肿瘤治疗已成为近年来抗肿瘤药物研发的热点。在前期研究中，我们在药效团4-芳胺基喹唑啉片段基础上，合理设计、合成了在6,7位骈合的立体结构更加稳定的杂环，并筛选发现了具有自主知识产权结构新颖的杂环并喹唑啉类抗肿瘤化合物。本项目以此类活性化合物为基础，采用化学空间分析方法及柔性分子对接模拟方法，进一步设计、合成匹配性能良好的可逆和不可逆EGFR不同类型小分子抑制剂。通过EGFR-TKs抑制活性体外筛选及体外细胞活性筛选，考察不同结构的杂环和不同取代基对活性的影响，进一步进行构效关系研究及结构优化，根据活性和毒性数据,发现针对EGFR药物靶标的具有自主知识产权的抗肿瘤药物。

运用柔性分子对接（Flexible Docking）方法，建立活性化合物B-2与EGFR 酪氨酸蛋白激酶（EGFR-TKs）的分子相互作用模型，同时将采用化学空间分析方法，通过计算机辅助设计，建立已报道的EGFR 酪氨酸激酶抑制剂的小分子化合物化学空间。以前两种模型为基础，采用固相合成和组合化学方法，利用模板及固液相反应相合，从“库到库”，固液相结合合成数类目标化合物库。对合成的目标化合物进行体外肿瘤细胞和EGFR 激酶的活性筛选，对已合成的目标化合物进行了体外肿瘤细胞系（高表达EGFR的人表皮癌细胞、高表达HER2的人乳腺癌细胞SKBr-3和EGFRL858R/T790M突变的人肺腺癌细胞H1975）的增殖抑制活性和EGFR 激酶（野生型EGFR激酶和突变型EGFRT790M激酶）的抑制活性的筛选。实验结果显示：所有合成的目标化合物对相应的肿瘤细胞和EGFR激酶都具有一定的抑制活性，特别是吗啉并喹唑啉和12-冠醚并喹唑啉这两个系列表现出较优的抑制活性，特别是针对耐药细胞株H1975，根据筛选结果，选取了其中的化合物9n和9p 进行了体外的肝微粒体稳定性和代谢酶抑制候选实验，并测试了其在小鼠体内的药代动力学性质，确定了化合物进行裸鼠移植瘤抑制实验，发现了苗头化合物9n。通过液相合成的方法，简单快速的 合成了多取代4-氨基吡啶类,芳基胍类,芳基脲类, 2-氨基吡络类,3-取代吲哚类五个化合物库。为后期合成具有全新母核和分子多样性的小分子EGFR抑制剂提供了物质基础。