蒙药森登-4汤煎煮过程中的化学变化、抗风湿性关节炎药效物质基础及作用机制的研究

In this study, research on chemical change of boiling process of Mongolian medicine Sendeng -4 Tang and efficacy of anti-rheumatoid arthritis material basis and mechanism of Sendeng -4 Tang would be carried out by the integrated use of chromatographic techniques, Mongolian medicine chemistry, pharmacology, drug metabolism genomics and chemometrics. Firstly, chemical substances in Decoction group of each individual prescription drug and Sendeng-4 decoction were studied by ESI (APCI) -MSn, GC-MS / MSn, UPLC-MS / MSn analysis techniques, and new substances generated from boiling process of Sendeng-4 Tang were identified, then clarify the nature of the chemical changes of boiling process of Sendeng-4 Tang. Secondly, anti-inflammatory activity of single decoction of sendeng-4 Tang, a total of decoction of sendeng-4 Tang and in different parts of Sendeng -4 Tang and monomer compound were evaluated by inflammatory cells in vitro model, then to clarify pharmacodynamic material basis of Mongolian medicine Sendeng -4 Tang. Thirdly, study of mechanism of Sendeng -4 Tang treated adjuvant arthritis was completed by method of metabolomics. Through above studies, to build the network of Sendeng -4 Tang - Disease role，and to clarify the material basis and mechanism of treatment of rheumatoid arthritis activity of Sendeng -4 Tang.

本课题将综合运用色谱联用技术、蒙药化学、药理学、药物代谢组学和化学计量学方法研究蒙药森登-4汤煎煮过程中的化学变化及其抗风湿性关节炎药效物质基础及作用机制。首先运用ESI(APCI)-MSn,GC-MS/MSn、UPLC-MS/MSn分析技术研究森登-4汤组方单煎液和复方共煎液的化学成分，从中辨识森登-4汤煎煮过程中生成的新物质，进而阐明森登-4汤煎煮过程的化学变化的本质。其次，采用体外抗炎细胞模型评价蒙药单煎液、共煎液以及森登-4汤不同部位和单体化合物的抗炎活性，从中阐明森登-4汤药效物质基础。其三，用代谢组学的方法研究森登-4汤治疗佐剂型关节炎的作用机制。通过以上研究，构建森登-4汤药效物质-疾病作用网络，阐明森登-4汤治疗类风湿性关节炎的物质基础及作用机制。

本研究综合运用色谱联用技术、蒙药化学、药理学、药物代谢组学和化学计量学方法研究蒙药森登-4煎煮过程中的化学变化及其抗风湿性关节炎药效物质基础及作用机制。首先，进行森登-4煎煮过程的化学变化进行研究。在分别建立蒙药森登-4中指标成分（分别为7种和8种）的HPLC、LC/MS定量分析方法的基础上，分析研究不同煎煮时间森登-4的化学成分的定性和定量研究。结果表明，森登-4在不同煎煮时间中指标成分的含量有变化，未检测煎煮过程中产生的新的物质。对森登-4指标成分的同时提取工艺进行了优化研究。其次，对森登-4中多糖进行分离纯化和结构分析；药物抗氧化能力是其提高人体免疫力指标之一，也是药物抗风湿作用指标之一。因此，对单味药及森登-4中多糖的抗氧化活性进行了测定。实验结果表明，由文冠木、栀子、诃子、川楝子配伍得到的复方森登-4的多糖抗氧化活性明显增强。多糖提取工艺进行了优化。用组学方法研究了森登-4的配伍机制。君药文冠木配伍成森登-4后 8 个化合物在两组间存在显著差异（P＜0.05） ，其中儿茶素、没食子儿茶素、双氢杨梅素、槲皮素的溶出量在配伍后下降，而 xanthocerasic acid、 3β-hydroxytirucalla-7,24-dien-21-oic acid、 3-oxotirucalla-7,24-dien-21-oic acid、芦丁的溶出量升高。蒙药复方森登-4 的抗炎及抗风湿活性可能与其中的君药文冠木配伍之后某些指标成分的溶出量变化有一定关系。最后，用佐剂诱导的大鼠类风湿关节炎模型对森登-4治疗风湿病的作用机制进行代谢组学研究。将UPLC-QTOF/MS技术与化学计量学方法相结合，对正常大鼠、类风湿关节炎大鼠及用蒙药复方森登-4干预后大鼠的血清中内源性小分子进行分析检测，并对代谢通路进行了分析，阐述了类风湿关节炎的发病机制及森登-4的治疗作用机制，为森登-4治疗类风湿关节炎疗效提供了理论依据。