蒙药复方森登-4的药效物质基础研究

蒙药复方森登-4是蒙医临床上常用的消肿止痛传统配方，亦为蒙医临床治疗风湿性关节炎的经典方剂，被收载于《中华人民共和国卫生部药品标准(蒙药分册)》。由文冠木、栀子、诃子、川楝子四味药组成,具清热，燥"协日乌素"，消肿，主治痛风、痹病、关节黄水病、水肿。用于关节炎、水肿。本课题在已完成结合抗炎、镇痛实验建立蒙药复方森登-4有效部位制备工艺及质量控制方法基础上，拟进一步对蒙药复方森登-4有效部位进行化学成分研究；建立胶原诱导性关节炎病理模型，探索蒙药复方森登-4的作用机制；完善其质量标准；通过对有效部位配伍HPLC指纹图谱配合胶原诱导性关节炎病理模型实验，采用多元线性回归分析，研究森登-4有效部位的谱-效关系，确定其抗风湿关节炎的有效成分群。采用添加对照品的方法，指认有效成分色谱峰，确定有效成分。通过本课题的研究，阐释森登-4抗风湿关节炎的药效物质基础、作用机制。

蒙药复方森登-4是蒙医临床上常用的消肿止痛传统配方，亦为蒙医临床治疗风湿性关节炎的经典方剂，被收载于《中华人民共和国卫生部药品标准(蒙药分册)》。由文冠木、栀子、诃子、川楝子四味药组成,具清热，燥“协日乌素”，消肿，主治痛风、痹病、关节黄水病、水肿。用于关节炎、水肿。.本课题对蒙药复方森登-4有效部位进行化学成分研究: 从蒙药复方森登-4中共分离、鉴定了33个单体化合物。其中13个为首次从森登-4分得，化合物12经文献检索未见报道，确认为新化合物。.建立了胶原诱导性关节炎病理模型，探索蒙药复方森登-4的作用机制：建立CIA模型,检测大鼠足爪炎症的肿胀度,石蜡切片HE染色对关节组织进行病理检查, 检查其改善局部关节炎症状,抑制CIA大鼠滑膜细胞增生,减轻炎性细胞浸润情况。MTT法检测脾淋巴细胞增殖反应,Western blotting法检测关节软组织中COX-2蛋白的表达, 酶免疫测定法法测定关节软组织中PGE2), 酶联免疫吸附试验法检测血清中炎症因子TNF-α、IL-6的水平。.完善其质量标准: 根据有效成分研究的结果，选择专属性的方法与合适的对照品（从分离得到的化学物质中筛选针对药效更专属的对照品），达到质量标准的提升。.建立了森登-4药材和有效部位的薄层层析的定性鉴别方法，采用薄层色谱法对蒙成药中的栀子苷、杨梅素、槲皮素、芦丁、没食子酸进行了薄层色谱鉴别。建立有效部位中总类成分（总黄酮、总萜）和指标性成分（栀子苷、槲皮素、杨梅素、芦丁）的含量测定方法。.建立了蒙药复方森登-4体内外特征图谱，归属并鉴定其体外化学成分及体内吸收入血成分。分析蒙药复方森登-4体外HPLC特征图谱，发现了共47个峰，共鉴定出15个蒙药复方森登-4成分；蒙药复方森登-4灌胃给药后出现了14个入血成分，9个为体外成分直接入血，另外5个推测为新生代谢产物；通过对有效部位配伍HPLC指纹图谱配合胶原诱导性关节炎病理模型实验，采用多元线性回归分析，研究森登-4有效部位的谱-效关系，确定其抗风湿关节炎的有效成分群。采用添加对照品的方法，指认有效成分色谱峰，确定有效成分。进行了网络药理学的研究，建立了蒙药复方森登-4化学成分-靶点-疾病网络节点图及相关信号通路。通过本课题的研究，阐释了森登-4抗风湿关节炎的药效物质基础、作用机制。