miR-26a通过多靶点调控膀胱癌上皮间质转化的机制研究

Epithelial-mesenchymal transition（EMT）is the fundamental of cancer metastasis and progression. microRNA plays an important role in the complex regulation network of EMT. In our previous research, we found that miR-26a was a tumor suppressor in bladder cancer, which could inhibit bladder cancer migration and invasion. Our current study intends to explore the regulation role of miR-26a in EMT in bladder cancer by forced expression of miR-26a in bladder cancer cell lines. We would also try to reveal the detailed molecular mechanism within the predicted signal pathways, i.e. HMGA1/Wnt，HMGA1/Notch，HMGA1/Pin1，GSK3β/ZEB1 and MTDH/AKT. Besides, the relationship between miR-26a/downstream molecules and clinico-pathological features/ prognosis of bladder cancer will be established. The results are supposed to illustrate the functional role of microRNA in bladder tumorigenesis and provide theoretical basis of targeted therapy via miR-26a in bladder cancer.

上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition ，EMT）是肿瘤转移和进展的基础，microRNA在EMT复杂的信号传导网络中发挥着至关重要的基因调控作用。我们在前期研究中发现miR-26a在膀胱中起着抗癌作用，其能抑制膀胱癌迁移和侵袭。本研究拟通过体外获得性功能实验进一步探究miR-26a对膀胱癌EMT的影响，并从初筛的HMGA1/Wnt，HMGA1/Notch，HMGA1/Pin1，GSK3β/ZEB1及MTDH/AKT信号通路中探索其具体分子机制。同时，我们还将在临床组织标本中检测miR-26a及其下游蛋白的表达水平，确立其与膀胱癌临床病理特征及预后的相关性。该研究的成功实施一方面将对膀胱癌的microRNA致病机制做一个补充，另一方面将为发展基于miR-26a的膀胱癌靶向治疗策略奠定一定的理论基础。

microRNA是肿瘤发生及演进过程中重要的分子。已有研究表明，其在膀胱癌的侵袭中也起着重要的作用。本研究项目主要对miR-26a调控膀胱癌上皮间质转化（EMT）的分子机制进行了相应的研究。我们通过获得性功能实验证实，miR-26a作为抑癌基因参与膀胱癌的EMT调控。这种调控作用的是通过多靶点实现的。我们采用生物信息学分析及荧光素酶报告系统等多种手段，证实了GSK3β是miR-26a调控膀胱癌细胞株EMT过程中的重要靶标。. 我们的研究结果主要集中在以下三个方面：1.miR-26a通过GSK3β基因的3'-UTR区域靶点序列直接从转录水平对GSK3β的表达水平进行调控；2.GSK3β基因沉默能获得与miR-26a过表达相类似的生物学效应，即抑制膀胱癌细胞的迁移和侵袭能力以及增殖能力，影响膀胱癌细胞的EMT。GSK3β基因同样可对EMT信号通路进行调控；3.通过分子克隆技术重载GSK3β可削减miR-26a过表达所产生的对膀胱癌细胞的抑制作用。以上研究结果表明，GSK3β是miR-26a发挥生物学效应的关键靶蛋白，miR-26a-GSK3β-EMT信号通路是膀胱癌细胞进展的重要信号链。miR-26a及GSK3β可作为膀胱癌靶向治疗的关键治疗靶点。