低淋巴道转移能力小鼠肝癌细胞株差异表达基因的克隆和功能验证

克隆鉴定转移相关基因对解析转移机制进而寻找有效的防御诊治靶点意义深远。在我们前期建立的低淋巴道转移能力小鼠肝癌细胞株抑制性消减杂交（SSH）文库中选取3个与GenBank无同源序列的cDNA片段，采用快速cDNA末端扩增法（RACE）获取全长cDNA序列；应用Multiple Tissue Northern (MTN ) Blots验证全长cDNA，利用生物信息学分析基因结构及其所编码蛋白质的信息；选取辐射杂种板(GB4)对新基因进行精细染色体定位；进而进行基因转染,在体及体外试验验证基因功能，建立该基因与淋巴道转移之间的因果关系，以期获得淋巴道转移相关抑制基因，为立足基因水平认知恶性肿瘤淋巴道转移机制提供线索，并为肿瘤转移的基因诊断、基因药物的研发及预后随访提供可能的靶位。