西瓜果实特异启动子的转录因子及其分子调控机制研究

西瓜果实特异启动子Wsp1 5'端缺失突变调控功能分析表明，该启动子365-455bp之间序列含负调控顺式作用元件；857-899bp之间43bp区段含果实特异顺式调控元件。DNA迁移率变动分析确定，核提取蛋白中存在与该DNA顺式元件结合的反式作用因子，即转录因子。为了更深入探明反式作用因子的特异调控机制，本项研究将采用酵母单杂交方法，构建西瓜果实cDNA表达文库，筛选分离编码产物与顺式元件特异结合的反式作用因子基因。并采用结构域缺失与点突变、RT-PCR、Northern-blot、凝胶阻滞电泳、酵母单杂交、酵母双杂交等分子生物学实验方法，对克隆基因的特性、同源进化、发育特异表达模式、自身调控模式及其编码蛋白的结构特征、转录结合与激活活性、蛋白质与DNA之间相互作用、蛋白质与蛋白质之间相互作用进行全面系统分析，以期阐明果实发育特异分子调控机制。