用RNA干涉技术研究棉铃虫细胞色素P450基因与抗药性的关系

本项目拟采用RNA干涉（RNAi）技术明确棉铃虫抗性品系中过量表达的2个P450基因(Cyp9a12和Cyp9a14)与拟除虫菊酯抗性关系。在体外分别制备这两个P450基因的双链RNA，通过微量注射导入棉铃虫卵或幼虫体内, 抑制相应P450基因的表达；同时，比较对照和导入双链RNA后的棉铃虫幼虫中两个P450基因表达水平的变化、对拟除虫菊酯抗性水平的变化和P450氧化酶活性的变化；最终明确这两个P450基因与抗药性的关系。与传统的单个P450基因离体表达相比，本项目具有两个明显的优点：（1）既可以研究单个P450基因的作用，也可以同时研究2个或多个P450基因之间的相互作用；（2）RNAi在活体条件下进行基因剔除研究，能更准确地反映目的基因的实际功能。通过本项目的研究，不仅可以明确这两个基因与抗药性的关系，同时可以为今后大规模应用RNAi技术研究昆虫功能基因组学提供新的技术平台。