新生鼠脑室周围白质软化模型中wnt/Beta-catenin信号通路和组蛋白去乙酰化酶对少突胶质细胞成熟的调节作用

早产儿最常见的脑损伤是脑白质损伤，少突胶质前体细胞对缺血缺氧易感性增高，成熟过程中断，髓鞘形成障碍是早产儿脑白质损伤的根本成因。本课题拟从影响少突胶质细胞发育过程的两个关键调控因子，wnt/beta catenin和组蛋白去乙酰化酶途径出发，使用Olig1cre在少突胶质细胞中特异性激活或敲除beta catenin，腹腔注射HDAC抑制剂，同时采用他莫昔芬诱导方式，构建在少突胶质细胞发育的特定时间点敲除HDAC1/HDAC2的条件性基因敲除鼠,观察在上述遗传背景下，少突胶质细胞对缺血缺氧的耐受程度，缺血缺氧损伤对少突胶质前体细胞增值、分化、凋亡及髓鞘形成等的影响，并努力寻找wnt/beta catenin和HDAC的相互影响，以期阐明脑白质损伤中影响髓鞘再生的机制，寻找一条切实有效的脑白质损伤的干预方法。

脑白质损伤是造成早产儿伤残的重要原因，缺血缺氧损伤影响少突胶质前体细胞（OPCs）增值、分化，造成髓鞘形成障碍是早产儿脑白质损伤的关键原因。少突胶质细胞发育过程受细胞内外一系列因素严格的时空调控，wnt/beta catenin和HDAC途径是其中重要的调控因子之一。本研究包含三方面内容：1）构建条件性转基因鼠，在少突胶质前体细胞阶段过表达及敲除beta catenin基因，研究wnt/beta catenin对少突胶质前体细胞成熟影响。2）分别在体内及体外构建脑白质损伤的PVL模型和OGD模型，体内对比过表达及敲除beta catenin转基因鼠与野生型鼠在少突胶质细胞增殖及分化方面的差别；体外对比过表达beta catenin的OPCs对缺血缺氧耐受程度变化。3）使用丙戊酸腹腔注射阻断HDAC1，观察阻断HDAC1对少突胶质细胞髓鞘形成的影响。建立VPA注射后PVL模型，对比VPA注射对少突胶质细胞缺血缺氧损伤的作用。研究发现：1.beta catenin对少突胶质细胞前体细胞增值、分化具有负反馈调节机制，在少突胶质细胞前体细胞阶段过表达beta catenin可造成髓鞘化障碍，髓鞘形成减少；2.beta catenin基因敲除鼠Olig2表达及MBP对缺血缺氧耐受程度有一定提高； 3.大剂量VPA对少涂胶质前体细胞成熟过程有抑制作用。4.体外研究发现过表达beta catenin及加入VPA似乎可减轻OPCs缺血缺氧损伤。其具体机理不清，有待进一步研究。.本研究提示控制beta catenin表达可能有减轻缺氧缺血脑白质损伤可能。