基于CCL20/CCR6通路对Th17细胞的募集作用探讨"从肺论治肾炎"机制

本项目以中医理论"肺为水之上源"为指导，从"上呼吸道感染诱发和加重肾小球疾病"的临床现象出发，以链球菌感染致Th17/Treg免疫失衡为切入点，在项目组前期工作基础上，首次提出链球菌感染激活CCL20/CCR6通路募集Th17细胞致肾小球炎症损伤这一免疫学过程可能是还原和验证"从肺论治肾炎"治则理论的物质基础之一。基于此，本项目拟以合并扁桃体炎的IgA肾病患者为研究对象，分离其扁桃体中溶血性链球菌及淋巴细胞，将上述淋巴细胞与人系膜细胞共培养，并采用溶血性链球菌灭活菌株及CCR6 siRNA对其干预；同时建立IgA肾病伴链球菌感染小鼠模型，应用CCL20抗体及麻黄连翘赤小豆加减方对其干预，研究Th17细胞在呼吸道溶血性链球菌感染相关性肾损害发生过程中的作用及CCL20/CCR6通路对上述过程的调控机制，为"从肺论治肾炎"提供充分的现代医学依据。

本项目以合并扁桃体炎的 IgA 肾病患者为研究对象，检测外周血Th17淋巴细胞表达情况；分离其扁桃体中甲型溶血性链球菌及淋巴细胞，用灭活甲型溶血性链球菌分别刺激人肾小管上皮细胞和肾小球系膜细胞，通过transwell小室分别于淋巴细胞共培养，以趋化IgA肾病患者外周血CD4+T淋巴细胞，明确趋化情况，检测淋巴细胞趋化受体及配体水平；在此基础上，建立 IgA 肾病伴链球菌感染小鼠模型，应用抗 CCL20 抗体及麻黄连翘赤小豆加减方对其干预，研究 Th17 淋巴细胞在呼吸道溶血性链球菌感染相关性肾损害发生过程中的作用及CCL20/CCR6 通路对上述过程的调控机制。通过体内体外研究，本项目多层面证实了CCL20/CCR6 通路对 Th17 细胞的募集作用，明确了肺肾调控作用的物质基础及其发生功能障碍的免疫学机制，为“从肺论治肾炎”提供了现代医学依据。. 通过本项研究我们获得以下科学结论：1.IgA肾病患者体内存在免疫失衡，而慢性扁桃体炎可加重IgA肾病患者体内的免疫失衡，其机制可能与Th17/Treg细胞通过相应细胞因子调控CCL20-CCR6通路有关。 2.链球菌感染可以加重Treg/Th17免疫失衡，释放IL-17等细胞因子，作用于肾小管上皮细胞、系膜细胞等，激活CCL20-CCR6通路，从而加重IgA肾病肾脏病变。3.抗CCL20抗体和麻黄连翘赤小豆汤对链球菌感染相关性IgA肾病具有保护作用，其作用途径可能主要通过阻断CCL20/CCR6 通路调节Th17/Treg免疫平衡得以实现。4.甲型溶血性链球菌感染可刺激肾小管上皮细胞表达Th17淋巴细胞趋化因子，肾小管上皮细胞除履行自身非免疫细胞功能外，在炎症状态下尚具备招募Th17淋巴细胞的能力，而这可能是通过趋化因子CCL20的趋化作用完成。. 通过本项研究共撰写了8篇论文，其中5篇已公开发表或即将发表，其他3篇已投稿，等待接收，部分科研成果已在ASN与CSN会议上发言或壁报交流并获得优秀壁报奖；课题组培养研究生6名（已毕业博士3名，硕士1名，在读博士生1名，在读硕士生1名）；与美国德克萨斯休斯顿医学中心张文正副教授（中南大学湘雅医院客座教授）建立了长期密切的科研合作关系；联合培养博士生（肖舟）1名。后续，本课题组将认真整理所有研究内容与资料，拟申报省部级科技成果奖和参与国家重点科研基金项目申报。