清热凉血方调控血热型银屑病SOCS1抑制JAKs/STATs通路的机理研究

JAK/STATs(the activation of Janus proteintyrosine kinase/signal transducer and activator of transcription) activated by numerous cytokines and growth factors, especially interleukin(IL)-6, interferon(IFN)-γ，is a core signal transduction pathway .There is necessary proximity in the pathogenesis of psoriasis.Currently,The research shows blocking cytokines has a contribution to the keratinocytes,it can block the occurrence and progression of psoriasis through inhibiting over proliferation of keratinocyte and decreasing secreation of inflammatory cytokines.The other study also found suppressor of cytokine signaling 1(SOCS1)can play a positive role in the treatment of psoriasis via suppressing JAKs/STATs singal pathway .In Our study, using Heat-clearing blood-cooling formula to intervene Transgenic Animal Models with STAT3 overexpression,to investigate the effect of Heat-clearing blood-cooling formula on SOCS1, JAKs/STATs signal transduction pathway factor.And establish JAKs/STATs activated cell model, Using the serum containing drugs of Heat-clearing blood-cooling formula to intervene the model,reveals the up-regulation of SOCS1 can produce negative regulation of JAKs/STATs signal pathway from the respects of timeliness and dose correlation, followed the release of cytokines ,such as interferon(IFN)-γ that play the role of the treatment of psoriasis.and by further clinical research,to verify the result of Animals and cytology results each other,so that Clarify the therapeutic mechanism of Heat-clearing blood-cooling formula on Blood-Heat type psoriasis,and rich the dialectical theories in Chinese Medicine of psoriasis.

JAKs/STATs是IFN-γ、IL-6等细胞因子的核心转导通路，与银屑病的发病机制关系密切。研究表明阻断细胞因子对角质形成细胞的作用，可以抑制角质形成细胞的过度增殖、减少炎症细胞因子的分泌，从而阻断银屑病的发生。研究发现细胞因子信号转导抑制因子1（SOCS1）可以抑制JAKs/STATs信号通路，对银屑病的治疗有积极作用。本项目拟通过清热凉血方干预STAT3过表达的转基因动物模型验证清热凉血方对SOCS1和JAKs/STATs通路信号转导因子的影响；并建立JAKs/STATs激活细胞模型，运用清热凉血方含药血清进行干预，从时效性、剂量相关性等方面揭示其上调SOCS1对JAKs/STATs信号通路产生负性调节，减少INF-γ等细胞因子的分泌从而发挥治疗银屑病的作用；并通过进一步的临床研究与动物和细胞学研究的结果进行相互验证，阐明清热凉血方对血热型银屑病的疗效机制，丰富银屑病中医辨治理论。

JAKs/STATs是IFN-γ、IL-6等细胞因子的核心转导通路，与银屑病的发病机制密切相关。研究表明阻断细胞因子对角质形成细胞的作用，可以抑制角质形成细胞的过度增殖、减少炎症细胞因子的分泌，从而阻断银屑病的发生。已有研究发现细胞因子信号转导抑制因子1（SOCS1）可以抑制JAKs/STATs信号通路，对银屑病的治疗有积极作用。.本课题分别通过清热凉血方及有效成分单体丹皮酚、芍药苷干预STAT3过表达的银屑病小鼠模型验证清热凉血方对SOCS1和JAKs/STATs通路信号转导因子的影响；并建立JAKs/STATs激活的体外细胞模型，运用清热凉血方含药血清进行干预，从时效性、剂量相关性等方面揭示其治疗银屑病的作用。.通过研究发现：①成功运用咪喹莫特乳膏外涂于BALB/c小鼠背部皮肤8天诱导出银屑病样小鼠模型，皮疹表现及病理改变与银屑病相似。②雷公藤多甙组及不同浓度清热凉血方浸膏组小鼠皮损改变较模型组不同程度好转，其中以清热凉血方高浓度组效果最佳。③模型组小鼠皮肤中SOCS1、STAT3、TNF-α、IL-1β、IL-6及IFN-γ的mRNA及蛋白表达水平均较空白组明显升高，各治疗组均较模型组不同程度降低，并明显与浓度呈正相关。④芍药苷、丹皮酚各组均能下调STAT3基因及蛋白表达水平，以高浓度组作用最强。各治疗组中SOCS1表达水平均较模型组明显下降，并明显与STAT3通路活性呈正相关。⑤通过IFN-γ、IL-6刺激HaCaT细胞建立JAKs/STATs信号通路激活的银屑病体外细胞学模型，最佳刺激因素可选择IFN-γ50ng/ml、IL-6 10ng/ml刺激48小时。⑥丹皮酚对HaCaT细胞银屑病模型炎症因子有一定抑制作用，但其上调SOCS1基因作用不显著；芍药苷可能通过上调SOCS1基因表达，进而抑制炎症因子的分泌发挥治疗银屑病的作用。.综上所述，SOCS1、JAKs/STATs信号通路可能参与银屑病的发病过程。其中SOCS1可能成为银屑病治疗的有效靶点。清热凉血方是治疗血热型寻常性银屑病的有效药物，其单体丹皮酚、芍药苷有效性的验证，为今后清热凉血方应用于临床提供科学依据。针对血热病因病机，治以清热解毒，凉血活血，并通过调控SOCS1的水平从而抑制STAT3通路活性，继而抑制炎症因子的表达，进而发挥治疗银屑病的作用。