多成分组方揭示补阳还五汤治疗缺血性脑中风的多靶点作用机制及配伍内涵的探索研究

我们曾从灌胃补阳还五汤(治缺血性脑中风)动物血、尿中鉴定其可吸收成分和代谢产物70多个，发现其中10余个成分具抗脑中风的多种相关活性，推测这些成分组方可能具有补阳还五汤功效。本项目拟在继续寻找其它可吸收成分的同时，大量积累相关成分，选15-25个可吸收成分组方，用动物模型检验其是否具有补阳还五汤抗缺血性脑中风作用，期望通过筛选组方成分种类和比例，找出较好作用的成分组合(成分复方)。针对缺血性脑中风病理环节网络，在整体动物、组织、细胞和分子层次寻找该成分复方作用靶点；在成分复方中各成分的可能作用靶点上研究该成分或多个成分的作用特点，据各成分在各靶点的作用特点，阐明它们的协同关系。本项目对深刻揭示补阳还五汤有效成分、作用机理及配伍内涵，创制成分明确、机制清楚、质量可控、疗效优良的多成分、多靶点的治疗缺血性脑中风的新型复方具有重要意义;对其他中药复方研究、抗脑中风新型药物研发等亦具重大推动作用。

（一）完成了拟选择的补阳还五汤15个主要吸收成分的大量制备，建立了这些化合物的制备工艺，并均获得了克级以上的量。这不仅保证了本项目中多成分组方药理学研究的顺利进行，还为今后对成分复方进行深入研究奠定了物质基础。.1、从蒙古黄芪中分离制备了14个异黄酮类化合物，其中1个为新化合物，4个为首次从该植物分离得到。其中包括组方成分毛蕊异黄酮苷、芒柄花素、黄芪紫檀烷苷等。.2、建立了从川芎中制备藁本内酯的工艺，可获得克级的藁本内酯，并解决了藁本内酯不稳定不易贮藏的问题。.3、建立了高纯度芍药苷的制备工艺。.（二）确定了补阳还五汤中组方成分的含量以及这些成分的有效剂量，对成分复方的稳定性进行了考察，设计了三种组成的成分复方。.（三）对补阳还五汤的抗脑中风药理作用进行了研究，发现补阳还五汤在第7天时具有显著的减少梗死体积的作用，验证了模型的可靠性，同时也确证了补阳还五汤的有效性和作用阶段，为进一步寻找有效成分复方、确定作用机制等研究提供了科学依据。.（四）采用大鼠脑中风MCAO模型，对补阳还五汤及成分复方的药效学进行了量效关系研究。令人兴奋地发现成分复方与补阳还五汤原方一样显现疗效; 成分复方低剂量组作用最好，并且优于补阳还五汤原方。由此证明该成分复方是一个有效的复方，有可能用来代替补阳还五汤原方（饮片组方）用于临床；我们首次用众多化学成分的组合证明中药化学成分就是中药复方治疗作用的物质基础，这是中药复方有效成分研究的一个重要突破。.（五）对成分复方中各个化学成分的作用靶点进行了研究。比较了各个成分对同一靶点的作用强弱，确定了针对某一靶点的主要成分，初步揭示了这些成分之间的协同作用。.（六）继续对补阳还五汤的吸收成分和代谢产物进行了研究，从灌胃补阳还五汤后的小型猪尿中分离鉴定了25个成分，其中9个为新化合物。发现6个代谢产物具有和复方药效相关的活性。这使我们对补阳还五汤入血成分的认识更为清晰，有助于确定其药效物质基础。.（七）对补阳还五汤中单味药赤芍、川芎的吸收和代谢研究取得了新的进展，为选择组方成分提供了依据。对揭示这两种中药材的体内显效形式，以及选择质量控制的指标成分都有重要意义。.（八）继续对补阳还五汤及成分复方中的组方化合物进行了代谢研究，并取得了重大进展。这有助于揭示原方及成分复方的作用机制和体内直接药效物质基础。.（九）本项目已发表SCI论文2篇、核心期刊1篇、会议论