CBX8促进肝癌细胞增殖的分子机制研究

Hepatocellular carcinoma (HCC) is a highly malignant tumor with very poor prognosis. However, the molecular mechanisms underlying HCC progression remain largely unknown. Increasingly evidences have demonstrated that the PcG contributed to tumorigenesis and played important roles in the malignant progression of tumors. Recently, we found that the expression of CBX8 in HCC tissues was significantly higher than those in the adjacent tissues and overexpression of CBX8 indicated a poor overall survival. We also found that silencing CBX8 made p53-targeted genes increasing and inhibited the proliferation of HCC cells significantly. Exogenous CBX8 combined with p53 directly. In our study, we aim to explore the role of CBX8 in HCC and clear that the mechanism may be through the regulation of p53 pathway, and to elucidate the expression and clinical significance of CBX8/p53 in HCC tissues. We propose a new mechanism that CBX8 promotes the proliferation of HCC cells through the regulation of p53 pathway. Our study may provide a new idea of the molecular mechanism underlying HCC progression and a novel potential therapeutic target for the comprehensive HCC treatment.

肝细胞癌恶性程度高，预后差，其发生发展机制尚未完全阐明。已有研究表明，多梳基因家族蛋白（PcG）与肿瘤发生发展关系密切。我们在前期研究中发现多梳基因家族蛋白CBX8在肝癌中呈显著高表达，且与不良预后相关；基因芯片结果表明在肝癌细胞中沉默CBX8，p53下游靶基因表达上调，并显著抑制肝癌细胞增殖能力；体外实验表明CBX8与p53存在直接相互结合。本项目拟沉默或过表达CBX8，在细胞水平、动物模型中，研究CBX8在肝癌中的作用，并明确其可能的机制是通过调控p53信号通路。同时，在肝癌组织标本中探讨CBX8/p53通路的临床意义，从而明确CBX8可能通过调控p53通路促进肝癌细胞增殖的新机制，为诠释肝癌发生发展的分子机制和寻找肿瘤治疗新靶点提供有力的科学依据。

肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma，HCC）恶性程度高，预后差，其发生发展机制尚未完全阐明。已有研究表明，多梳基因家族蛋白（PcG）与肿瘤发生发展关系密切。我们在本研究中发现多梳基因家族蛋白CBX8 mRNA及蛋白质在肝癌组织中呈显著高表达，在HCC大样本中检测发现CBX8表达水平与患者乙肝表面抗原、肿物直径、被膜侵犯以及TNM分期相关，CBX8高表达的HCC病人预后不良。体外细胞功能学实验发现敲降CBX8肝癌细胞增殖、克隆形成能力明显下降，过表达CBX8肝癌细胞增殖、克隆形成能力增强，体内动物实验发现过表达CBX8肝癌细胞在裸鼠体内成瘤能力显著增强。细胞周期检测发现敲降CBX8可明显抑制肿瘤细胞G1/S期转换，过表达CBX8后可显著促进肿瘤细胞G1/S期转换。细胞凋亡检测发现，敲降CBX8可促进肿瘤细胞发生凋亡，过表达CBX8可抑制肿瘤细胞发生凋亡。肝癌细胞过表达CBX8后，P53、P21、Bax、Caspase 3蛋白表达降低，Cyclin D1表达升高；沉默CBX8后P53、P21、Bax、Caspase 3蛋白表达升高，Cyclin D1表达降低，而Cyclin A、Cyclin E表达水平均无明显变化；在沉默CBX8的肝癌细胞中敲降p53，可明显削弱沉默CBX8导致的细胞周期G1/S期的转换抑制作用，可明显削弱沉默CBX8导致的细胞增殖及平板克隆形成能力的抑制作用，可明显削弱沉默CBX8导致的细胞凋亡促进能力。本课题组采用了分子生物学、细胞生物学及免疫学等一系列方法，在人体肝细胞癌病例、细胞功能学实验、动物模型中进一步开展了深入研究，探讨了CBX8在HCC细胞增殖、凋亡和肿瘤发生、发展过程中的作用及其机制，发现了CBX8可以通过调控p53信号通路影响肝癌细胞的增殖和凋亡的新机制，本研究为诠释肝癌发生发展的分子机制和寻找肿瘤治疗新靶点提供有力的科学依据。