腺苷A2a受体和多巴胺D2受体二聚化对小鼠视网膜神经信号调制的研究

腺苷A2a受体和多巴胺D2受体在视网膜神经信号的调节中起着重要作用。本研究拟采用A2a、 D2受体基因敲除以及和 A2aD2受体基因双敲除小鼠作为研究对象。首先通过免疫荧光双标法检测A2a和 D2受体在视网膜上共表达的情况以及表达该受体的细胞类型；免疫共沉淀法检测D2和A2a受体在视网膜上的相互作用。然后利用全细胞膜片钳技术结合药物干预的方法，对基因敲除小鼠视网膜薄片上及分离的小鼠视锥细胞和双极细胞的膜电位进行研究。通过上述研究将为阐明多巴胺D2受体和腺苷A2a受体二聚化在视网膜神经机制中的作用提供实验数据，为进一步阐明视觉信息处理和传递提供理论依据。

视网膜神经信息的传递是相当复杂的，弄清视网膜神经信息的传递的机制将有助于对视觉形成的认识。近年研究发现，腺苷作为一种神经调质在视网膜的神经活性调节中也有重要作用。本研究发现对A2a受体基因敲除小鼠进行了明适应ERG检测，首次发现，与野生型小鼠相比，A2a受体基因敲除小鼠明视ERG的a、b波振幅值明显下降，而多巴胺D2受体基因敲除小鼠则表现出相反的作用，说明腺苷A2a受体和多巴胺D2受体均对视网膜神经信息具有调控作用。多巴胺是一种与神经元细胞放电率有关的抑制性神经递质，一般认为多巴胺在视网膜神经元发挥抑制性作用。近来研究发现腺苷A2a受体与多巴胺D2受体的功能则是相互拮抗的，且A2a/D2受体二聚化可调节D2受体的功能。我们的结果也证实视网膜上均有这两个受体的表达，并且免疫功沉淀也提示这两个受体之间有相互作用。本项目的进一步研究还发现腺苷A2a受体能够通过两受体二聚化作用拮抗多巴胺D2受体对双极细胞膜电位的抑制作用。本研究结果不仅将为A2a受体与D2受体二聚化对视网膜神经信号的调节提供证据，而且也将为视觉形成提供一定的理论依据。