钩藤"久煎则无力”的降压药效物质基础研究

In TCM, U. rhynchophylla has been used to extinguish wind, arrest convulsions, clear heat, and pacify the liver. According to "Ben Cao Hui Yan" (Book on Herbs), U. rhynchophylla should be added last when the herbs of the prescriptions are decocted. The aim of the present study is to find out the antihypertensive compounds of U. rhynchophylla. Firstly, a software-based method combined with UPLC-Q-TOF-MS/MS is used to discriminate and identify the different compounds between in the different-time processed decoction. Secondly, prepare the different compounds by online fishing and knockout technology for holistic activity and interaction evaluation. Thirdly, screen some bioactive components by high-content analyzing the phenotypic transformation of vascular smooth muscle cells. Finally, evaluate the antihypertensive activity of these bioactive components in spontaneously hypertensive rats.

《本草汇言》"钩藤久煎便无力"，现代药理研究也表明，钩藤煎煮20min以上，其降压作用便会降低。据此，我们提出"钩藤的降压药效物质基础与其久煎变化的成分存在相关性"的假说，拟通过明确钩藤随煎煮时间延长而消长(质和量)变化的成分，达到阐明其降压药效物质的目的。课题拟首先对煎煮不同时间的钩藤水提物进行高血压大鼠的降压实验，验证和评价煎煮对药效的影响，明确发生显著药效差异的煎煮时间点；接着采集特定煎煮时间水提物的高分辨质谱数据，经软件的比对分析，搜寻煎煮后发生变化的离子(丰度的增减及离子的有无)，根据精确质量数预测分子离子和碎片离子的化学式，结合构建的钩藤化合物数据库，搜索和确证差异离子化学式的结构，明确煎煮发生变化的成分；然后用色谱定向捕获/敲除技术制备差异成分/组分及敲除后样品，进行血管平滑肌细胞表型调控和高血压大鼠药效评价，从而阐明钩藤的降压药效物质基础，揭示其"久煎则无力"的科学内涵。

祖国医药对钩藤的煎煮法一直强调“后下”，2015年版《中国药典》亦规定钩藤的用法为“后下”。据此，我们课题组提出了"钩藤的降压药效物质基础与其久煎变化的成分存在相关性"的假说。通过三年研究，本项目阐明了：①钩藤煎煮30min、15min、5min舒张血管的效果明显优于60min。②0-60min内钩藤水煎液中成分个数随煎煮时间的延长而明显增多，且所含成分的质量数逐步增大；0-30min内钩藤水煎液中生物碱含量随煎煮时间延长而升高，30min达到最大值，若继续煎煮至60min含量反而下降。③钩藤碱单次和多次给予自发高血压大鼠，显示具有确切的降压活性，为钩藤降压药效物质基础之一。该研究有助于指导临床合理用药，确定钩藤适宜的煎药时间；有利于制药企业生产钩藤有效组分/部位时，更具针对性地控制生产工艺，提升产品质量。共发表国际刊物3篇，国内核心期刊4篇，国内一般期刊2篇，申请专利1项，培养硕士研究生2名。