适体TA介导共载双靶向给药系统逆转乳腺癌耐药性作用的研究

The resistance of endocrine therapy for breast cancer has brought new challenges for the effective treatment; therefore, it’s urgent to find a new drug to solve the resistance problem. We use PAMAM as vectors simultaneously carrying chemotherapy drug (Tamoxifen) and gene drug (LMTK-3 siRNA), select thioaptamer (TA) of the CD44 molecules in the cell membrane as head group targeting breast cancer, through the dual function as bridging polyethylene glycol (NHS-PEG-MAL), building aptamer - polyethylene glycol - polyamidoamine contained Tamoxifen and siR-L: [TA-PEG-PAMAM/(TAM/siR-L)] new drug delivery system to target the breast cancer cells at the cellular and molecular level. We will elaborate the endocytosis mechanism, the distribution characteristics in vivo and the effect of anti- resistance by investigating the method of intracellular transporter, the expression of cell proliferation and apoptosis-related protein. Our project could safely and effectively deliver TAM and siR-L targeting to the breast cancer cells, and make use of the biological therapies to improve the effect of chemotherapy drugs. We will open up a new way to solve the problem of resistance in the breast cancer endocrine therapy, meanwhile, provide a theoretical basis and methods for other tumor biological targeting therapy designs.

乳腺癌内分泌疗法耐药性的出现，为其有效治疗带来新难题，因此急需找到可以降低其耐药性的药物。本课题拟选择可共搭载化疗药物与基因的PAMAM作为载体，包裹具有抑制LMTK-3蛋白表达、降低TAM耐药性的siRNA，以乳腺癌细胞膜CD44分子的硫代适体TA作为靶向头基，通过双功能的聚乙二醇作为桥接，构建适体-聚乙二醇-聚酰胺胺/(他莫西芬/siR-L）[TA-PEG-PAMAM/(TAM/siR-L)]的新型靶向纳米给药系统，实现对乳腺癌在细胞层面和分子水平的双靶向治疗效果。通过考察载体入胞方法、细胞增殖与凋亡相关蛋白表达检测等实验，探讨其入胞机制、分布特征及抗耐药作用效果。通过本课题研究，能安全有效地将TAM和siR-L共同靶向递送至乳腺癌细胞，利用生物疗法提高化疗药物的效果，为解决乳腺癌内分泌治疗的耐药性开辟了一条新途径，同时也为其他肿瘤的生物靶向治疗的设计提供理论依据和方法借鉴。

乳腺癌是严重影响女性身心健康甚至危及生命的最常见恶性肿瘤。内分泌治疗法是目前临床上利用药物治疗乳腺癌最为有效的方法，它通过影响雌激素与雌激素受体的结合以到达抑制乳腺癌细胞生长的目的。他莫昔芬（TAM）是典型的雌激素受体调节剂类药物，几乎一直是乳腺癌内分泌治疗的金标准药物，尽管激素治疗药物的运用效果显著，但癌症监测研究表明50%的患者对药物会产生耐药性，本研究以聚阳离子高分子材料PAMAM为药物载体，共载化疗药物他莫昔芬和可抑制LMTK-3蛋白表达的基因药物siRNA，利用寡核苷酸适配体为靶向头基，靶向具有CD44表达乳腺癌细胞，共同构建了以TA适体介导的靶向纳米复合物TA-PEG-PAMAM/(TAM/siR-L) 作为新型纳米主动靶向给药系统，实现对乳腺癌在细胞层面和分子水平的双靶向治疗效果，并通过考察载体入胞方法、细胞增殖与凋亡相关蛋白表达检测等实验，探讨其入胞机制、分布特征及抗耐药作用效果。结果显示：经适体修饰的纳米给药系统，具有更好的靶向性，以及更优的抗肿瘤活性，同时，安全性高，稳定性强，易于合成，经济成本低。TA-PEG-PAMAM/(TAM/siR-L)的合成为今后进一步发展主动靶向治疗乳腺癌给药系统，提供了理论依据和实验基础。