新型多肽载体引导蛋白质靶脑转运的研究

目前尚无理想的方法实现蛋白质等大分子物质的靶脑转运，开发靶脑载体是解决这个难题的有效途径。本项目使用具有嗜神经性的狂犬病毒糖蛋白衍生肽段(RDP)和具有膜通透性的膜穿透肽(MPP)，构建新型多肽靶脑载体RDP-MPP，研究RDP-MPP的作用及跨膜机制。首先，以绿色荧光蛋白和β半乳糖苷酶为指示，通过动物体内实验证明RDP-MPP能携带蛋白质靶向脑内神经元转运。其次，将具有脑靶向性、无免疫原性的RDP-MPP，与功能性蛋白质胆碱乙酰基转移酶（ChAT）连接，形成融合蛋白RDP-MPP-ChAT，研究RDP-MPP引导ChAT靶脑转运并发挥生物学作用。另外，使用培养的仔鼠海马神经元细胞探讨RDP-MPP引导蛋白质的跨膜转运机制。本研究将为大分子蛋白质的靶脑转运提供一个安全有效的方法。对其进行研究和尝试将拓宽蛋白质在中枢神经系统中的应用，并为其他功能性大分子物质靶脑转运提供理论依据与技术支持。

在本项目的支持下，课题组研究出了一种新型的靶脑载体，以解决生物大分子物质难以通透血脑屏障进入脑内这个难题。本项目使用具有嗜神经性的狂犬病毒糖蛋白衍生肽段(RDP)和具有膜通透性的膜穿透肽(MPP)，构建出了新型多肽靶脑载体RDP-MPP，实验验证RDP-MPP的作用及跨膜机制。首先，以绿色荧光蛋白和β半乳糖苷酶为指示，通过动物体内实验证明了RDP-MPP能携带蛋白质靶向脑内神经元转运。其次，将具有脑靶向性、无免疫原性的RDP-MPP，分别与功能性蛋白质胆碱乙酰基转移酶（ChAT）、脑源性神经营养因子（BDNF）连接，形成了融合蛋白RDP-MPP-ChAT和RDP-MPP-BDNF，研究了RDP-MPP引导蛋白质靶脑转运并发挥生物学作用。另外，使用体外培养的神经元细胞探讨了RDP-MPP及其融合蛋白的跨膜转运机制。本研究为大分子蛋白质的靶脑转运提供一个安全有效的方法，还拓宽了蛋白质在中枢神经系统中的应用，并为其它功能性大分子物质靶脑转运提供理论依据与技术支持。