电针介导Wnt/β-catenin信号转导通路调控纤维环细胞机制研究

颈椎病的根本病理变化是椎间盘退变，Wnt 信号通路对椎间盘纤维环细胞分化和退变起重要调控作用，基于以上研究结果及课题组前期基础，本课题在复制大鼠颈椎病动物模型基础上，以细胞生物学、分子生物学、免疫等技术为平台，通过电针为干预手段，采用定量RT-PCR、Western Blot等技术，检测Wnt1、LRP-5、GSK-3β、Axin、β-catenin等信号分子基因、蛋白的表达，深入研究大鼠颈椎间盘纤维环细胞内Wnt/β-catenin信号转导通路，观察电针在调控该信号转导通路中的作用靶点、强度以及协同或拮抗效应，阐明电针介导该信号通路在延缓纤维环细胞退变过程中的机理，为防治颈椎间盘退变性疾病提供更确切的方法。

目的：电针对颈椎病模型大鼠椎间盘纤维环细胞凋亡及wnt-β-catenin信号通路的影响。方法：SPF级SD大鼠40只，采用完全随机化区组设计方案，将40只SD大鼠分成空白对照组（空白组）、模型对照组（模型组）、模型电针治疗组（模针组）、模型美洛昔康片对照治疗组（美洛昔康组），每组10只大鼠。建立动静力失衡性颈椎病模型，手术造模后饲养两个月。模针组取电针针刺治疗，每次留针30 min，1次/天，14天为1个疗程，两疗程之间间隔2 d，共治疗2个疗程。美洛昔康组:给予美洛昔康片灌胃治疗两个疗程。空白组、模型组均只作固定而不做其它任何处理。采用HE染色和Toluidine blue染色观察颈椎椎间盘形态学的变化，TUNEL法检测椎间盘细胞阳性表达，免疫组化和western blot检测Wnt、GSK-3β、Axin、P-β-catenin、β-catenin等蛋白的表达情况。结果：电针能降低椎间盘纤维环凋亡细胞的阳性表达，与模型组相比有显著差异。电针能显著提高Wnt、GSK-3β、Axin、P-β-catenin、β-catenin蛋白的表达水平。结论：电针能抑制颈椎病模型大鼠纤维环的细胞凋亡，其取效途径与电针激活wnt-β-catenin信号通路有密切关系。