鞘内KB-R7943和SEA0400治疗神经病理性疼痛的研究

神经病理性疼痛临床表现为疼痛过敏和异常疼痛，其发病机制目前仍不明确，治疗上相当棘手。钠钙交换蛋白(NCX)是最近国内外的研究热点，在调节细胞内Ca2+浓度发挥重要作用。既往我们的研究表明Na+泵抑制剂哇巴因、Na+-H+交换抑制剂阿米洛利存在抗神经性疼痛作用。我们的预实验结果发现，大鼠鞘内注射NCX抑制剂KB-R7943产生抗神经病理性疼痛作用，提示神经性疼痛发生机制可能涉及NCX，同时我们也期待NCX能够成为神经病理性疼痛治疗的新靶点。本研究大鼠鞘内KB-R7943和SEA0400治疗神经病理性疼痛的作用，采用免疫组织化学、Western Blot等技术探讨神经元和小胶质细胞细胞膜上NCX活性表达的变化；运用膜片钳技术，分析鞘内注射KB-R7943和SEA0400如何影响细胞膜Ca2+电流发挥作用，从新的基础领域探讨神经病理性疼痛的机制，为神经病理性疼痛的治疗和药物开发提供理论依据。

背景：神经病理性疼痛的临床治疗非常棘手，目前没有特殊有效的治疗方法。方向：本研究采用大鼠鞘内置管，建立经典神经病理性疼痛模型（SNL），评估KB-R7943（由于SEA0400无法购买，故只使用KB-R7943实验）治疗神经病理性疼痛的效应，探讨其可能的作用机制。主要内容：大鼠鞘内成功置入PE-10 管后，建立脊神经结扎病理性疼痛模型（SNL）,鞘内分别注入不同剂量的KB-R7943。采用行为学测试、免疫荧光、Westren blot 技术，探讨KB-R7943作用的可能机制。重要结果：KB-R7943（5~20 ug）对于神经病理性疼痛的治疗存在一定作用，其作用在一定范围内随着剂量增加而增加。免疫荧光发现NCX主要表达于脊髓背角和背根神经节内，然而SNL模型术后背根神经节内的NCX蛋白表达水平发生改变。鞘内注射KB-R7943后,背根神经节内与Ca2+浓度相关的MAPKs磷酸化水平降低。结论：鞘内注射KB-R7943存在抗神经病理性疼痛作用，其作用机制可能与抑制脊髓背根神经节NCX反向转运，降低背根神经节内Ca2+浓度和MAPKs磷酸化有关。