KGF脂质超声微泡在门静脉数字化限流肝切除术中保护作用的研究

Hepatic resection is the basis of liver surgery. Perioperative liver protection is crucial for recent survival and long-term prognosis. Particularly in China, by high incidence of hepatic cirrhosis, how to reduce the risk of surgery, promote postoperative hepatocyte regeneration, delaying fibrosis, is one of the core technology in the field of liver resection. In preliminary studies, we had developed a digital flow limiting device for normal liver resection, find an optimal ratio for portal limiting, and successfully achieved three patents. At the same time, the applicant has focused on KGF effects in multiple injury models ever since a long time, which is closely associated with liver fibrosis through a variety of ways. However, prevention is clear while the treatment is not. Therefore, we assume that in the liver cell injury, animal models of cirrhosis of.liver resection , combined with ultrasound-based digital limiting, applying a newtransfection technology, UTMD (ultrasound targeted microbubble destruction),to promote KGF, KGFR expression, to observe perioperative survival and liver regeneration , and finally in the microRNA level to explore the possible molecular mechanisms . We want to discover the optimal portal limit ratio during hepatectomy with acute or chronic liver injury, especially with hepatic cirrhosis, and to make clear "KGF-KGFR" protective effect of specific mechanisms, to find some new targets , to validate whether KGFR expression is the key in such progress as above, so as to improve operation formula and perioperative care.

肝切除术是肝脏外科的基础，围手术期肝脏保护是影响近期生存和远期预后的关键。特别是我国肝硬化高发，通过什么方式降低手术风险，促进术后肝细胞再生，延缓纤维化进程，是肝切除手术的核心技术之一。前期研究中，我们开发了数字化限流装置，用于正常肝切除，探讨了门脉限流最佳比例，并成功获得专利；同时，申请人长期以来研究发现，KGF同肝纤维化进程密切相关，能通过多种途径进行肝保护；但是，预防明显，治疗不明确。因此，我们设想在肝损伤细胞模型、肝硬化肝切除动物模型中，结合数字化限流的超声基础，应用新型UTMD转染技术，促进KGF、KGFR表达，观察围手术期生存和肝再生，并在mir水平探讨可能的分子生物学机制。我们希望获得异常肝功条件下肝切除术的门脉限流最佳比例，明确“KGF-KGFR”保护作用的具体机制，发现新的作用靶点，验证KGFR表达变化是否上述机制的关键，进而改良术式，为围手术期监护、诊疗技术进步提供线索

中国是肝病大国，“肝炎-肝硬化-肝癌”疾病轴严重影响病患生活质量及生命健康。在肝胆外科手术实践中，肝切除是基础中的基础。目前仅有完全开放和完全夹闭两种，对肝脏血流限制的方式，不可避免带来“出血-缺血”这一不可调和的矛盾。课题组希望通过本项目，研发可行的数字化限流装备，探讨可行的肝脏血流限制方式和比例，并对肝手术中，损伤-修复病程，影响肝细胞正常修复的分子机制进行探讨。. 课题组研究了KGF-KGFR及相关细胞生长因子信号通路在肝损伤，特别是存在肝硬化基础疾病条件下，所发挥的保护性作用及相关机制，对肝再生的调控机制及影响“肝硬化-肝癌”疾病进程的分子通路进行了研究。具体成果如下：.①发现目标mir。mir24通过对p53基因的抑制作用，在 “肝硬化-肝癌”病程中发挥重要作用，并且增强了恶变肝细胞的侵袭性，对远期预后产生重要影响。mir-219-5p，在肝硬化模型中，通过对肝脏星形细胞KGF分泌的抑制，影响肝损伤后的正常再生；动物模型注射反义mir将改善肝硬化病程。mir-26a-5p能够抑制HGF等细胞生长因子的翻译，影响肝细胞正常再生，对其抑制将减轻肝硬化，改善病程。.②信号通路。通过四氯化碳成功诱导小鼠肝硬化模型，对肝病人群mir的样本分析，在此模型中，KGF对于促进肝硬化肝细胞正常再生可能具有重要意义；同时，另一个细胞生长因子，HGF通过对干细胞分化的调控，能够促进损伤修复过程中，肝细胞的正常再生。.③正常肝切除模型中，闭合肝动脉，达到“出血-缺血”最佳的门静脉限流比例区间可能为70%-80%。. 基于上述发现，完成人以第一作者发表SCI收录论文5篇，累积影响因子12.422分；并以共同第一作者发表SCI收录论文2篇；总计影响因子15.096；获得国家专利1项，并申请3项在途（实用新型，加报发明专利）；先期部分成果进行了成果转化，以第一完成人身份获得解放军总医院2015年度科技进步二等奖，证书号：2015YK207。