ω-3脂肪酸对移植肝胆管损伤的保护作用及其分子机制研究

移植肝胆管病是指因缺血、免疫反应或感染等因素引起的弥漫性或局灶性移植肝的胆管树狭窄、扩张、毁损或管型形成，胆汁的磷脂/胆盐比例失衡、血-胆屏障/胆管上皮屏障功能障碍和胆汁流的改变与移植物胆管病的临床病理改变密切相关。本研究针对胆汁组分改变、胆汁流和血-胆屏障/胆管上皮屏障功能的关键病理生理环节，揭示细胞膜脂质微区域(raft/caveolae)调控磷脂转运蛋白、紧密连接(Occludin, JAM-1, ZO-1, claudin-1/-3/-5)和原纤毛膜蛋白TRPV4和polycystin功能，改善移植术后胆汁流及血-胆屏障/胆管上皮屏障功能的分子机制；阐明ω-3脂肪酸在调节胆汁中脂质分泌、增加胆汁流、改善血-胆屏障/胆管上皮屏障功能、减轻瘀胆和胆管损伤的作用机理；评价ω-3脂肪酸治疗移植物胆管病的可行性。为临床设计移植物胆管病的系统化防治方案提供新的思路，具有较好的临床应用前景。

移植肝胆管病是指因缺血、免疫反应或感染等因素引起的弥漫性或局灶性移植肝的胆管树狭窄、扩张、毁损或管型形成，胆汁的磷脂/胆盐比例失衡、血-胆屏障/胆管上皮屏障功能障碍和胆汁流的改变与移植物胆管病的临床病理改变密切相关。本课题主要研究结果：⑴建立了稳定的重建肝动脉血供及胆汁外引流的大鼠肝移植模型并利用自制的输液保护架和输液泵经大鼠颈静脉进行输液治疗；⑵长时间冷保存大鼠肝移植术后炎症反应及胆管细胞损伤较重，而ω-3脂肪酸预处理可明显减轻炎症反应；⑶冷保存大鼠肝移植术后胆管纤维组织增生明显，而ω-3脂肪酸能明显减轻胆管的纤维增生；⑷免疫组化Ki-67检测提示ω-3脂肪酸可明显减轻冷保存损伤后肝移植的胆管上皮的增殖反应；⑸扫描电镜检测提示长时间冷保存后胆管上皮的微纤毛和原纤毛破坏明显，而ω-3脂肪酸对其有保护作用；⑹ω-3脂肪酸能改善冷保存大鼠肝移植术后的肝功能。本实验结果可为移植物胆管病的预防和治疗提供理论基础和实验依据，初步证实了ω-3脂肪酸治疗移植物胆管病的可行性。为临床设计移植物胆管病的系统化防治方案提供新的思路，具有较好的临床应用前景。