KSHV跨膜蛋白K15诱导血管新生及其信号途径研究

Kaposi's Sarcoma (KS) is a angiogenic tumor,the angiogenesis and inflammation may induce hyperplasia damage, and thus cause malignant tumor. Angiopoietin-2 (Ang-2)was found to be a key factor in tumor-driven angiogenesis. We found that early KSHV infection could induce the expression of Ang-2. Mechanistically, KSHV activated the Ang-2 promoter via AP-1 and Ets1 transcriptional factors, which were mediated by ERK, JNK and p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathways. In this project, based on what we have already known, we will continue investigating the function of KSHV transmembrane prortein K15 in the angiogenesis. We will investigate whether K15 will induce the expression of Ang-2, whether K15 will induce angiogenesis. We will clarify whether K15 induces the angiogenesis via AP-1 and Ets1 transcriptional factors. We will investigate the role of MAPK pathways in the induction of Ang-2 by K15. This project will bring to light the function of K15 in the induction of tumor by KSHV, and provide the theory by which the therapeutic target of tumor angiogenesis is to be found.

卡波氏肉瘤（KS）是一种血管源性肿瘤， KS 病灶中的血管新生和炎症可能会促进增生状损伤转成恶性肿瘤。血管生成素2(Ang-2) 被认为是在肿瘤驱使的血管新生过程中的一个重要因子。我们发现卡波氏肉瘤相关疱疹病毒( KSHV）在感染早期可诱导 Ang-2 的表达， KSHV 通过激活 AP-1 和 Ets1 来诱导Ang-2的表达，而激活AP-1和Ets1又是通过ERK, JNK 和 p38 MAPK 信号途径。本课题在我们已有研究基础上，继续研究KSHV跨膜蛋白 K15 在引起血管新生中的作用；将研究K15 是否可以诱导 Ang-2 的表达；是否可以促进血管新生；阐释 K15 是否通过AP-1和 Ets1细胞因子来调控Ang-2 的表达；最后重点研究MAPK信号途径在K15诱导Ang-2中的作用。本研究将揭示K15在KSHV诱导肿瘤中的作用，为寻找控制治疗致瘤血管新生的治疗靶点提理论依据。

卡波氏肉瘤（KS）是一种血管源性肿瘤， KS 病灶中的血管新生和炎症可能会促进增生状损伤转成恶性肿瘤。Ang-2 被认为是在肿瘤驱使的血管新生过程中的一个重要因子。我们发现 KSHV 在感染早期可诱导 Ang-2 的表达， KSHV 通过激活 AP-1 和 Ets1 来诱导 Ang-2 的表达，而激活 AP-1 和 Ets1 又是通过ERK, JNK 和 p38 MAPK 信号途径。本课题在我们已有研究基础上，继续研究KSHV跨膜蛋白 K15 在引起血管新生中的作用；将研究K15 是否可以诱导 Ang-2 的表达；是否可以促进血管新生；阐释 K15 是否通过 AP-1和 Ets1 细胞因子来调控 Ang-2 的表达；最后重点研究MAPK信号途径在K15诱导Ang-2中的作用。本研究将揭示K15在KSHV诱导肿瘤中的作用，为寻找控制治疗致瘤血管新生的治疗靶点提供理论依据。首先我们将K15P和K15M及其突变体在293T细胞中的表达，结果表明我们能够在293T细胞中表达K15P和K15M及其突变体。接着我们观察K15P是否能诱导Ang-2的表达。在293T细胞中通过RT-PCR，我们能够证明K15可以诱导Ang-2的表达。我们还研究了K15P对不同ang-2启动子截断体的活性影响。关键转录因子位点的缺失会导致ang-2活性的下降。在缺失了E3和E7位点后，ang-2启动子的活性分别上升了27倍和3倍，说明这两个位点可能会下调ang-2的表达。最后，我们研究了不同显性负突变体和抑制剂对K15P上调ang-2活性的影响。研究表明，在加入了TRAF-2、RAS、JNK、ERK1和ERK2的显性负突变体后，ang-2启动子的活性下降，活性分别为对照的17.1%、18.9%、35.1%、4.3%和4.0%。而加入TRAF-6的显性负突变体，ang-2启动子的活性没有变化，为对照的1.06倍。研究表明，ERK、JNK和p38信号通路的抑制剂能够降低K15P对ang-2启动子活性的诱导。在加入U0126、SB203580和JNK Inhibitor Ⅱ，ang-2启动子的活性分别为对照的57%、27.5%和13.6%。而在加入BAY 11-7082后，ang-2启动子的活性为对照的90.1%。说明NF-κB参与K15对ang-2的激活。