艾叶炭炮制原理研究

工作假说：炒炭过程中艾叶物质基础和生物活性均发生了变化，或产生新的止血活性成分，或主要成分（群）含量或组成比例发生了改变，形成了比例适宜的主要成分群,在多成分、多靶点综合作用下，增强艾叶炭温经止血作用。. 研究方法：①对艾叶炭进行全成分分析，寻找艾叶炭中新产生的成分及主要成分比例变化的部位，在药效学筛选的指引下，对新产生的成分和成分变化的部位进行分离、纯化、结构鉴定和样品累积。②对艾叶(炭)样品、新产生的成分和变化部位进行体内（止、凝血，PT、TT、APTT，血小板功能等）和体外（活化血小板JNK1以及血管内皮细胞等）活性比较，确定艾叶炭止血作用增强的物质基础，阐明其止血作用机理。③制备系列"存性"程度艾叶炭，对其"存性"程度与活性成分和止血功效增强之间的关系进行研究和关联性分析，阐明艾叶炭的炮制原理，为"血见黑则止"的炮制理论发展提供科学依据。

本项目通过艾叶制炭过程中成分的变化，结合止血有效部位作用机理研究，解析艾叶炭炮制原理。①以止、凝血时间为指标，对艾叶（炭）中黄酮、鞣质等成分群、阴性部位及各极性部位进行活性筛选，结果艾叶中黄酮成分群具有活血抗凝作用，艾叶炭中二氯甲烷部位为主要止血活性部位。②首次对艾叶炭止血活性部位进行成分分离，得到14个化合物，其中新化合物1个，具有较强促凝活性，命名为艾叶酮，是艾叶制炭后止血活性增强的主要因素；对艾叶进行定向分离，得到12个化合物。③通过HPLC-DAD、HPLC-Q/TOF-MS、GC-MS、UV等手段，对艾叶制炭前后挥发油、黄酮、鞣质及各极性部位的成分进行比较，结果艾叶制炭后成分发生了较大变化，各成分在质和量以及组成的比例关系上均有改变；④艾叶制炭后具有抗凝活血活性的黄酮类成分含量降低，是止血活性增强的重要因素；⑤艾叶制炭后，水提液中水溶Ca2+含量升高，吸附阳离子后的水提液仍具较好的止血活性；艾叶制炭前后HPLC均未检出没食子酸、鞣花酸等鞣质类成分；艾叶中含有绿原酸等酚酸类成分，制炭后其含量明显降低；该三类成分与艾叶制炭后止血活性增强相关性不大。⑥艾叶制炭确能增强止血作用，炮制不及或太过均达不到增强止血作用的目的。⑦挥发油类成分制炭后发生变化，其抗炎止痛活性和毒性均降低。⑧通过模型动物止血及对血管内皮细胞释放因子影响等实验，进行了止血活性及作用机制研究，结果艾叶制炭后确能增强止血作用，其机理主要是通过增加纤维蛋白原含量，缩短纤维蛋白原向纤维蛋白转化时间，降低纤溶酶原的激活，促进血小板功能达到增强止血的作用。体外活性实验结果表明，艾叶炭止血活性部位及新产生的成分艾叶酮均能降低人主动脉血管内皮细胞释放组织因子抑制剂，提高血管性血友病因子含量，对止血过程具有积极作用。.艾叶炭炮制原理：艾叶制炭后所含成分发生量变和质变，既有活血成分的降低，又产生了具有止血作用的新的活性成分，此变化为其药效作用增强的物质基础。艾叶炭止血作用的增强是多种因素共同作用的结果；艾叶制炭确能增强止血作用，且制炭必须存性，炮制不及或太过均达不到制炭目的，验证了“血见黑则止”的传统炭药理论。.艾叶炭炮制原理：艾叶制炭后所含成分发生量变和质变，既有活血成分的降低，又产生了具有止血作用的新的活性成分，此变化为其药效作用增强的物质基础。艾叶炭止血作用的增强是多种因素共同作用的结果；艾叶制炭确能增强止血