印楝素对昆虫蜕皮激素受体(EcR/USP)调控作用研究

植物性杀虫剂在害虫的综合防治和环境保护工作中有广泛的应用前景，印楝素(Az)代表着植物性农药新潮流的前沿,但其生化作用模式还远远没有研究清楚。在我们近期的研究中，发现经Az处理的昆虫蜕皮激素受体蛋白表达量显著降低。蜕皮激素受体(EcR)的表达在昆虫的生长发育过程中被严格的调控并起着极为重要的作用。利用在果蝇、家蚕中已知编码EcR和USP的cDNA序列，克隆斜纹夜蛾EcR和USP基因，利用酵母和大肠杆菌表达系统得到蜕皮激素受体蛋白(EcR，USP)，研究Az与EcR/USP和配基蜕皮激素受体（20E）之间的相关性；通过共转染EcR和USP在哺乳动物细胞中重建20E的应答反应，研究Az对昆虫EcR下游基因表达的调控作用；通过Northern杂交及蛋白免疫印迹方法，进一步检测Az对EcR/USP在转录及翻译后的调控。以期充分地阐明Az的作用机理，同时为以EcR为靶标新农药的开发提供理论依据。