Hsa_circ_0072387作为肝母细胞瘤分子诊断和预后标志物的研究

Circular RNAs (circRNAs) are of great value in the diagnosis and prognosis of various tumors. Our previous work has demonstrated that hsa_circ_0072387 was aberrantly overexpressed in the tumor tissues and serum of hepatoblastoma patients by high-throughput sequencing. In addition, hsa_circ_0072387 could regulate the proliferation, migration, invasion, and apoptosis of hepatoblastoma cells. Moreover, we found that hsa_circ_0072387 was negatively correlated with the expression level of tumor suppressor gene let-7b in hepatoblastoma cells, suggesting that hsa_circ_0072387 might affect the malignant phenotype of hepatoblastoma by acting on let-7b. This project will focus on the following: 1) explore the underlying mechanism of let-7b as a direct target gene of hsa_circ_0072387, while further search and verify other potential targets of hsa_circ_0072387 through combination of RNA-seq transcriptomics and iTRAQ proteomics. 2) Identify the role of hsa_circ_0072387 to serve as a molecular marker of hepatoblastoma. Our study will provide new ideas for the diagnosis and prognosis of hepatoblastoma.

环状RNA（circRNAs）在多种肿瘤的诊断和预后判断中具有重要价值。我们前期通过高通量测序技术发现hsa_circ_0072387在肝母细胞瘤患者的肿瘤组织和血清中异常高表达，细胞学实验表明hsa_circ_0072387可以调控肝母细胞瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡；同时我们发现hsa_circ_0072387与肝母细胞瘤细胞内经典抑癌基因let-7b的表达水平呈负相关；提示hsa_circ_0072387可能通过作用于let-7b影响肝母细胞瘤的恶性表型。本项目将专注于以下内容：1）深入探讨let-7b作为hsa_circ_0072387靶基因的作用机制，并通过转录组学与蛋白组学检测扩大搜寻并验证hsa_circ_0072387的潜在靶点及其功能；2）明确hsa_circ_0072387作为肝母细胞瘤分子标志物的可行性。本项目的完成将为肝母细胞瘤的分子诊断和预后评估提供新的思路。

本项目研究中，我们发现相对于非肝母细胞瘤组织，肝母细胞瘤组织中 circ_0072387 的表达水平增加，而 let-7b 的表达水平降低。 敲低 circ_0072387可增加let-7b 的表达，降低增殖、侵袭、迁移和抗凋亡能力，并下调 HB中 FAK 的表达。 我们发现 let-7b 削弱了 FAK 的表达以抑制 HB 细胞的恶性表型，表明 let-7b 是 FAK 功能障碍的原因。 重要的是，我们发现 circ_0072387 可以通过靶向 let-7b 上调 FAK。 最后，我们通过皮下瘤和原位瘤模型进一步验证了circ_0072387的 敲低抑制了 HB异种移植物的生长。本研究将为肝母细胞瘤的诊治提供新思路，为肝母细胞瘤的临床诊治提供新的突破点。