miR-146a对类风湿关节炎MDSCs分化为破骨细胞的调控及小乌桂颗粒的干预研究

Rheumatoid arthritis (RA) is a kind of autoimmune diseases, which will result in disabling. However, the pathogenesis of RA has not been fully elucidated. Our previous studies showed that Myeloid-derived suppressor cells (MDSCs) and microRNA-146a (miR-146a) was increased in RA patients, and MDSCs could differentiate into Osteoclasts (OCs) and promote the bone destruction. However, the pathogenesis is not elucidated. Other studies showed that miR-146a can influence the polarization of OCs by regulating the signaling pathway of TRAF6-NF-κB-TNF-α. Here comes the question: is miR-146a influence the polarization of OCs differentiated from MDSCs by regulating this signaling.pathway?In this project, we aim to answer this scientific hypothesis and illuminate the mechanism of how miR-146a regulate the procedure of MDSCs differentiate into OCs, and how the Traditional Chinese Medicine (TCM) Xiao Wu Gui granule protect RA patients from bone destroy. We will use the animal model of collagen induced arthritis as well as the cell model of MDSCs differentiated into OCs. This project is a new exploration of the pathogenesis of “how MDSCs promote RA”, and also a new exploration of the therapeutic mechanism and therapeutic target of “how TCM cure RA”.

类风湿关节炎（RA）是一类致残性自身免疫病，其发病机制尚未完全阐明。课题组前期研究发现RA患者中髓源抑制性细胞（MDSCs）和微小RNA(miR)-146a表达升高，且MDSCs可分化为破骨细胞（OCs）并促进骨破坏，但具体机制不清。既往研究显示miR-146a可通过调控“TRAF6-NF-κB-TNF-α”信号通路影响OCs分化，那么，miR-146a是否通过调控该信号通路来影响RA中MDSCs分化为OCs？本项目拟在前期研究的基础上，以胶原诱导的关节炎小鼠模型和MDSCs体外分化为OCs细胞模型为研究对象，探讨并验证上述科学假说，阐明miR-146a调控MDSCs分化为OCs的分子机制；随后通过有效治疗RA的中药小乌桂颗粒对该分子机制的作用研究，丰富小乌桂颗粒治疗RA的作用靶点及机制。本项目即是对“MDSCs促进RA”发病机制的新探索，也是对“中药治疗RA”疗效机制和作用靶点的探讨。

类风湿关节炎（RA）是一种慢性炎症性自身免疫病，目前其发病机制仍未完全明确。miR-146ａ、miR-15、Ets-１、IRAK在RA发病中可能起重要作用。本课题通过对RA患者PBMC中miR-146a、 miR-155、 Ets-1、IRAK１表达水平的检测及结合临床指标进行相关分析，探讨其在RA发病中的作用及其与疾病活动度的关系。目前治疗的RA的药物虽能改善患者病情，但药物不良反应明显，临床上小乌桂汤治疗类风湿关节炎确有疗效，具体机制尚未清楚。很多的学者发现MDSC在多种自身免疫疾病中显著增加。G-MDSC可以抑制Th1、Th17细胞免疫反应；M-MDSC与炎症程度相关。本课题通过观察小乌桂汤对胶原诱导性关节炎小鼠MDSCs亚群及Th17、Treg的影响并进行相关性分析探讨小乌桂汤治疗类风湿关节炎的免疫学机制。研究结果显示，RA患者PBMC中miR-146a、miR-155相对表达量显著升高；RA患者PBMC的Ets-１表达水平降低；RA患者PBMC的IRAK1表达水平显著降低。在RA患者中miR-155表达水平与血沉正相关而与血红蛋白负相关；Ets-1与CRP负相关；IRAK1与 RF、DAS28、总补体负相关。结果提示，RA高活动组患者PBMC中miR-146a、 miR-155表达升高，Ets-1、IRAK1表达降低，可能参与了RA发病过程的调控。研究结果显示小乌桂汤中、高剂量组小鼠关节炎指数评分、足掌肿胀程度，较模型组能显著降低。小乌桂汤中、高剂量组小鼠外周血G-MDSC比例较模型组均显著升高，M-MDSC比例均显著降低。小乌桂汤低、中、高剂量组脾脏中G-MDSC比例较模型组均显著升高，M-MDSC比例均显著降低。小乌桂汤中、高剂量组小鼠Th17细胞比例较模型组均显著降低，Treg细胞比例均显著升高。CIA小鼠中AI与外周血中M-MDSC呈正相关,与脾脏中MDSCs、G-MDSC呈负相关,与脾脏中M-MDSC成正相关。CIA小鼠外周血中M-MDSC的比例与Th17的比例成正相关；G-MDSC的比例与Treg的比例呈正相关。CIA小鼠脾脏中M-MDSC的比例与Th17的比例呈正相关；G-MDSC的比例与Treg的比例呈负相关。小乌桂汤中、高剂量组较模型组小鼠踝关节病理总评分显著降低。综上所述，小乌桂汤可以显著改善RA。