IGF-II mRNA结合蛋白IMP3对人肾细胞癌侵袭、转移的调控机制研究

近年来肾细胞癌发病率逐年递增，发生转移者预后很差。胰岛素样生长因子(IGF)-II mRNA结合蛋白IMP3是一个癌胚蛋白，在肾细胞癌标本中的表达与患者的高转移危险性和低生存率密切相关。而IMP3在肾细胞癌侵袭转移中的作用及其机制还未知。我们应用免疫组化和FISH分别检测了国人肾细胞癌标本中IMP3的蛋白水平和DNA扩增水平，再检测其mRNA表达水平；利用IMP3表达水平高低不同的肾细胞癌细胞株研究IMP3是否通过影响细胞生长、运动、粘附、浸润伪足形成和侵袭能力作用于肾细胞癌的转移；研究IGF-II、VEGF和PI-3K/Akt等信号通路在IMP3对RCC细胞侵袭中的调控作用；并以体内转移实验进行验证；为今后开发以IMP3为靶点的抗肾细胞癌转移药物提供实验依据。

胰岛素样生长因子(IGF)-II mRNA结合蛋白IMP3是一个新的癌胚蛋白，在转移性肾细胞癌中高表达，且其表达与患者的低生存期明显相关，而IMP3在肾细胞癌侵袭转移中的作用及其机制还未知。我们首先与美方单位合作，对IMP3在469例局限性透明细胞型肾细胞癌中的表达及与预后的关系进行研究。我们发现16% (73/469)的病例存在IMP3的表达，且IMP3的表达与肾细胞癌的肿瘤大小、Fuhrman分级（1,2 vs 3 vs 4）、肾周脂肪累及、镜下血管侵犯、肿瘤坏死、出现肉瘤样成分以及肿瘤T分期 （T1 vs T2 vs T3）均显著相关（P <0.0001）。IMP3的阳性表达（HR为2.22，P=0.0006）、出现坏死、肾周脂肪累及和镜下血管侵犯都是肿瘤独立的生存预后因素。因此IMP3可以作为局限性肾细胞癌的一个独立预后指标。接下来我们分别建立了过表达IMP3的Caki-1细胞系和敲低IMP3的Sh-IMP3Achn细胞系。我们发现IMP3可以促进Caki-1细胞的运动、迁移和侵袭能力。相应地，在Achn细胞中，敲低IMP3则明显抑制了细胞的迁移。之后我们用RNA 测序法对IMP3-Caki-1细胞的基因表达情况进行全面分析，发现NF-κB通路的多个分子表达明显上调，并通过real-ttime PCR 进行了验证。IL-8作为NF-κB通路的一个重要的下游分子，其分泌明显增高。通过抑制剂的实验，说明IMP3促进细胞迁移的作用可能是通过激活NF-κB通路而实现的。综上，我们基本完成了本课题的预设目标，在大样本中验证了IMP3是局限性透明细胞型肾细胞癌的一个独立预后因素。IMP3能够促进肾细胞癌细胞的迁移和侵袭，很可能是通过NF-κB通路的激活而发挥作用的。我们撰写了一篇SCI论文，已投稿。一篇中文综述，已投稿。一篇中文论著，在撰写中。