利用SAGE技术对大鼠干细胞样肝癌细胞基因表达模式的系统研究

利用荧光激活的流式细胞分选边缘群技术，可从多种肝癌细胞系及原代大鼠肝癌细胞中分离得到具有显著干细胞特征的"特殊"肝癌细胞亚群，进一步的鉴定结果表明，这些干细胞样肝癌细胞与肝癌组织的生长、侵袭和转移等密切相关。干细胞样肝癌细胞的出现是肝癌形成过程中的最重要的早期事件，而研究干细胞样肝癌细胞演变过程中，伴随的早期基因表达谱变化，不仅有助于进一步阐明早期肝癌发生的分子机制，同时也为探索肝癌早期诊断的分子标志提供实验依据。为完整呈现不同诱癌阶段干细胞样肝癌细胞的基因表达谱，本研究拟利用DEN诱发大鼠肝癌形成为模型，通过FACS分选肝边缘群细胞，借助基因表达系列分析的研究方法（简称SAGE），构建不同诱癌阶段的干细胞样肝癌细胞SAGE文库，通过对文库中的标签序列测序，分析各标签序列出现的频度，从而定性和定量地反映基因表达谱的变化；同时利用多元统计分析的方法初步建立起早期肝癌发生的分子模型。