猪肌肉MyHC基因表达的遗传多样性及其与肉质形成的分子关联研究

猪肉品质的改良是生猪产业提升的重要方向。继肌肉脂肪含量指标之后，肌肉纤维类型调控作为肉质改良的突破口，已成为一种新的研究动向。本领域研究已明确成年动物骨骼肌表达的4种肌球蛋白亚基（MyHC）1、2a、2b和2x，分别在不同纤维类型中优势分布并与肉质性状相关，但现有研究水平尚不能为猪肉品质的精确调控和分子选育提供依据。本研究选择含有不同地方猪种（金华猪）血统比例的品种为遗传基础梯度背景，采用绝对定量实时荧光PCR技术研究揭示肌肉中最重要的结构和功能蛋白MyHC的编码基因表达差异与变化，在获得MyHC基因表达差异品种的基础上，进行能量代谢（测定高能磷酸化合物及代谢酶活性）、蛋白质组（2-DE技术）和功能基因组（cDNA-AFLP技术）三个层次的比较研究，寻找MyHC基因表达和肉质性状相关的功能因子，揭示肉质形成机理，为猪肉质分子育种候选遗传标记筛选和肉质精确营养调控提供新的科学依据。

肌纤维类型调控已成为猪肉质改良重要研究方向。基于此，项目组提出利用遗传背景梯度变化猪群，即含金华猪血统比例为100%(金华猪)、12.5%(浙江中白猪)、6.25%(杜浙猪)和0%(杜大长猪)，采用绝对荧光定量PCR、双向电泳、表达谱芯片等技术揭示4种成年型猪肌球蛋白重链亚基(MyHCI\IIa\IIx\IIb，肌纤维类型标志分子)基因表达多样性及与肉质分子关联的研究设想。研究发现，4种MyHC mRNA在不同遗传背景猪群表达存在明显差异，尤其MyHC mRNA组成比例与肉质性状显著相关；比较研究发现，较高比例MyHC I mRNA肌肉(金华猪)表现较高磷酸原转化能力和较低糖酵解能力，在分子水平表现较强氧化代谢、线粒体ATP生产、抗氧化应激以及细胞骨架与结缔组织形成等能力，可以解释MyHC mRNA组成比例与肉质性状相关关系；关联分子Wnt家族基因中的Wnt5a\7a\10b\11与MyHCs表达及肉质性状显著相关；预测到参与MyHC表达调控的转录因子14个和miRNA分子30个。项目为今后通过肌纤维类型途径进行猪肉品质遗传改良和营养调控奠定了基础。