Sorcin蛋白硝基化调控胶质瘤侵袭转移的分子机制研究

The high invasive ability is considered as the main causes of the high mortality rate of glioma. Previous study found nitration level of sorcin Y116 site was up-regulated in glioma tissues, and positively correlated with malignant degree of gliomas. In order to investigate the molecular mechanism of sorcin Y116 site nitration on invasion and metastasis, this proposal will analyze the effects of sorcin on invasion and metastasis in vivo and in vitro. Next we will establish the stable transfected glioma cell lines with mutant sorcin, wild-type sorcin Y116 and their corresponding control cell lines with empty vector transfection respectively, and analyze the effects of sorcin Y116 nitration level change on the invasive ability of glioma. Targeted proteomics will be used to identify sorcin interacted proteins in glioma and investigate the clinical significance of sorcin Y116 site nitration. These research results will provide the experimental basis for clarification of the molecular mechanism of nitration of Sorcin Y116 site in regulation of invasion and metastasis and new targets for glioma therapy.

高度侵袭性是导致胶质瘤高死亡率的主要原因。前期研究发现Sorcin Y116位点硝基化水平在胶质瘤组织中显著上调，且与胶质瘤的恶性程度呈正相关。为揭示Sorcin Y116位点硝基化在胶质瘤侵袭转移中的作用及其机制，本项目将分别在体内外水平观察Sorcin对胶质瘤侵袭转移影响的基础上，建立稳定转染的突变型和野生型Sorcin Y116胶质瘤细胞系模型，分析Sorcin Y116位点硝基化水平改变对Sorcin介导的胶质瘤侵袭转移能力的影响，同时采用靶向蛋白质组学方法筛选胶质瘤中Sorcin的相互作用蛋白，并探寻胶质瘤中Sorcin硝基化的临床病理意义。预期结果有助于阐明Sorcin硝基化调控Sorcin介导的胶质瘤侵袭转移的作用及其机制，为防治胶质瘤侵袭转移提供新的靶标。

肿瘤细胞高度侵袭性是胶质瘤高死亡率的主要原因，也是胶质瘤恶性进展过程中重要的生物学标志。项目组前期发现Sorcin蛋白在胶质瘤组织中表达上调，且质谱鉴定发现截短型Sorcin Y116（全长Sorcin Y159）位点发生蛋白质硝基化修饰。为深入阐明Sorcin蛋白高表达及其硝基化在胶质瘤细胞迁移侵袭中的作用及分子机制，本项目在分析Sorcin对胶质瘤细胞迁移侵袭影响的基础上，建立野生型和突变型Sorcin Y159转染的胶质瘤细胞系模型，分析Y159位点硝基化水平改变对Sorcin介导的胶质瘤迁移侵袭能力的影响。同时采用靶向蛋白质组学方法筛选胶质瘤中Sorcin的相互作用蛋白，并进一步探寻胶质瘤中Sorcin蛋白高表达及其硝基化的临床病理意义。.本研究表明，胶质瘤中高表达的Sorcin蛋白可通过活化PI3K/Akt/mTOR信号通路，诱导上皮间质转化（EMT），促进胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭。Y159位点突变能够逆转Sorcin介导的胶质瘤细胞迁移和侵袭，进一步证明了Sorcin Y159位点硝基化在胶质瘤恶性进展中的重要作用。组织芯片结果显示，胶质瘤中Sorcin蛋白的表达水平和硝基化程度均显著高于正常脑组织，并与临床胶质瘤级别密切相关。同时，在胶质瘤细胞中鉴定得到Sorcin的31个相互作用蛋白（独特肽段数≥2），并采用免疫共沉淀-Western blot、GST pull-down、免疫荧光共定位、截断体构建等方法对部分蛋白进行验证，为进一步研究Sorcin蛋白在胶质瘤进展中的作用机理提供新的思路。.通过该项目研究，我们首次提出并揭示了Sorcin蛋白硝基化调控Sorcin介导的胶质瘤细胞迁移侵袭的作用及其机制，为Sorcin蛋白硝基化作为防治胶质瘤侵袭转移的靶标提供科学依据。.本项基金项目共协助培养了博士研究生2人，硕士研究生2人。在本项目的资助下，课题负责人及参与者共发表科研论文5篇，其中 SCI 收录论文 3 篇（最高影响因子5.965），中文核心期刊（CSCD源）收录论文 2 篇，并获授权国家发明专利1项。