HBV宫内感染细胞极性模型的构建及感染机制的研究

我国是HBV感染的高发区，母婴传播是目前的主要传播方式，宫内感染又是阻断母婴传播失败的主要原因。而宫内感染的动物模型难以获得，又缺乏体外细胞极性共同培养的模型，故构建细胞极性模型来研究宫内感染机制既有必要又有重要的现实意义。本课题采用极性共同培养的方法，分别接种滋养层细胞、胎盘毛细血管内皮细胞于微孔膜的上、下面，建立能够模拟在体胎盘屏障的细胞极性模型并对其结构和功能进行鉴定；用双染或三染免疫组化技术检测CD209及CD209L在不同孕期胎盘、原代培养细胞及极性模型细胞中的分布；进一步通过不同来源的感染源（游离HBV颗粒及HBVDNA阳性的PBMC）感染构建的屏障模型，分别进行抗体阻断试验。电镜观察不同时点细胞内HBV颗粒变化，PCR测定细胞内复制中间体HBVcccDNA，明确HBV感染滋养层细胞的可能途径，为进一步研究宫内感染机制及宫内干预提供实验依据。