miR-146b-5p调控脂肪细胞分化的机制研究

miR-146b-5p是我们应用miRNA芯片筛选到的、在人前体脂肪细胞分化过程中表达显著上调的miRNA。我们前期发现：miR-146b-5p表达沉默能抑制人前体脂肪细胞分化；生物信息学预测KLF7是其靶基因，而KLF7是脂肪细胞分化的负性调节因子且其mRNA水平在miR-146b-5p表达沉默后明显升高，提示miR-146b-5p调控脂肪细胞分化可能与KLF7有关。本研究拟:观察miR-146b-5p过表达、表达沉默时脂肪细胞的分化情况及KLF7的表达变化；进一步将KLF7基因过表达、表达沉默，以论证miR-146b-5p影响脂肪细胞分化的KLF7机制；并采用荧光素酶报告系统验证miR-146b-5p对KLF7的调控作用。miR-146b-5p调控脂肪细胞分化及机制的研究未见报道，本研究有源头创新性，将有助于阐明脂肪细胞分化的调控机制，为肥胖防治提供潜在的靶标。

肥胖已经成为全球面临的一个严重公共健康问题。近年来的研究发现microRNA在肥胖和脂肪形成过程中起到重要的调控作用。miR-146b-5p是我们利用microRNA芯片技术筛选到的一条在人前体脂肪细胞分化过程中表达显著上调的microRNA，本项目着重研究miR-146b-5p对人前体脂肪细胞分化的影响，并探讨其作用机制。通过研究，我们发现过表达miR-146b-5p促进了人前体脂肪细胞的分化和脂质积聚；相反，抑制miR-146b-5p的表达脂肪细胞的分化进程也受到抑制。生物信息学分析预测脂肪分化负性调控因子KLF7是miR-146b-5p的靶基因，利用荧光素酶报告系统我们证实了KLF7是miR-146b-5p的直接作用靶标。通过进一步研究，我们首次发现miR-146b-5p促进脂肪细胞分化是通过抑制KLF7的表达，从而上调分化关键基因C/EBPα, PPAR γ和aP2的表达来实现的。通过体内研究，我们发现miR-146b-5p在饮食诱导肥胖（DIO）小鼠和超重、肥胖人群的内脏脂肪中的表达水平显著上调，KLF7的表达则显著下调，并且miR-146b-5p的上调丰度与BMI呈一定的正相关，提示miR-146b-5p可能与内脏型肥胖的发生相关。此外，我们还发现脂源性炎性细胞因子TNF-α、IL-6可以激活miR-146b-5p启动子的活性从而促进miR-146b-5p在成熟脂肪细胞中的表达，该结果提示miR-146b-5p可能在肥胖相关的炎性反应中起到一定的作用。