人附睾表达精子结合蛋白prdx-6的功能及分子调控机制研究

过氧化氧化还原蛋白（peroxiredoxin，prdx ）是广泛存在于各种生物体的重要的抗氧化酶系。prdx-6主要在哺乳动物组织中表达，与心脏、肺和皮肤等多种组织中的疾病的发生与保护密切相关。我们在研究人类附睾精子成熟中发现附睾上皮细胞高度表达prdx-6，并结合定位在精子顶体后区和尾部中段，据此推测其在精子成熟发育过程中具有重要的生物学功能。因此，本项目将运用多种细胞及分子生物学研究手段，探究prdx 6蛋白在人附睾精子成熟中的生物学特性及其分子调控机制，丰富人们对附睾精子成熟机制的认识，为男性生殖性疾病的预防、诊断与治疗提供理论依据。

Peroxiredoxin(prdx）是广泛存在于各种生物体的重要抗氧化酶系。prdx-6主要在哺乳动物组织中表达，与心脏、肺和皮肤等多种组织中的疾病发生与保护密切相关。我们在研究人类附睾精子成熟中发现附睾上皮细胞高度表达prdx-6，并结合定位在精子顶体后区和尾部中段，据此推测其在精子成熟发育过程中具有重要的生物学功能。因此，本项目运用多种细胞及分子生物学研究手段，探究prdx-6蛋白在人附睾精子成熟中的生物学特性及其分子调控机制。本研究①制备了高纯度的重组prdx-6蛋白，高效价、高特异性的prdx-6抗血清，以及有效的prdx-6过表达和干扰载体；②揭示了prdx-6蛋白具有增强精子和附睾上皮细胞抗H2O2损伤的活性，prdx-6蛋白还可以延长体外精子活力保持时间；③通过数字基因表达谱揭示了干扰prdx-6基因后，附睾上皮细胞中12个涉及生殖过程的通路，共71个基因表达发生变化，并通过RT-PCR对部分差异表达基因进行了验证；④深入分析差异表达基因发现在人附睾上皮细胞中，prdxs其他家族成员和其他抗氧化基因均无法代偿prdx-6基因的功能；人附睾上皮细胞中prdx-6基因可能具有调节细胞中ROS含量的功能，进而间接调控TGF-β信号通路；人附睾上皮细胞中干扰prdx-6基因后，细胞中的趋化因子家族CLC和CXCL中部分成员表达显著增加，与细胞凋亡发生相关的NF-κB基因表达上调。本研究结果丰富了人们对附睾精子成熟机制的认识，为男性生殖性疾病的预防、诊断与治疗提供理论依据。