德国小蠊中丝氨酸蛋白酶过敏原的鉴定及其对肥大细胞的作用研究

蟑螂已经成为仅次于尘螨的第二大过敏源。目前在我国常见的蟑螂种类是美洲大蠊和德国小蠊。其中德国小蠊是我国长江流域主要的蟑螂致敏物种。德国小蠊过敏原可以通过肥大细胞上特异性IgE受体激活肥大细胞释放多种炎症介质，引起过敏性哮喘。 近年来研究表明德国小蠊还有通过非IgE途径参与哮喘发生的机制。然而目前德国小蠊中这些蛋白酶成分还没有被鉴定出来。本项目通过蛋白纯化技术纯化出德国小蠊中的丝氨酸蛋白酶成分, 通过免疫印迹,ELISA和体外组胺释放试验验证其是否是过敏原。进一步克隆出这些丝氨酸蛋白酶基因, 通过酵母表达，进而研究这些蛋白酶成分对肥大细胞的激活作用并探讨其机制。从而阐明这些蛋白酶成分在过敏性哮喘发病中的作用。

蟑螂已经成为仅次于尘螨的第二大过敏源。目前在我国常见的蟑螂种类是美洲大蠊和德国小蠊，其中德国小蠊是我国长江流域主要的蟑螂致敏物种。肥大细胞被公认是哮喘效应阶段的核心细胞、即初级效应细胞，在外源性哮喘的发病机制中具有重要的作用。近年来研究表明德国小蠊可以通过非IgE途径参与哮喘发生的机制，然而德国小蠊提取物成分复杂，包含多种蛋白成分和非蛋白成分，进一步研究发现德国小蠊提取物中的蛋白酶成分引起上述参与上述哮喘症状的产生，而且这些蛋白酶成分是通过激活或者调节蛋白酶激活受体介导的。目前德国小蠊中这些蛋白酶成分还没有被鉴定出来。在本项目，我们通过蛋白纯化技术纯化出德国小蠊中的蛋白酶成分，并克隆出它们的基因, 在大肠杆菌和酵母中进行表达。对纯化和表达出的蛋白酶通过免疫印迹和ELISA验证其是否是过敏原。同时研究这些蛋白酶成分对肥大细胞的激活作用并探讨其机制，探索这些蛋白酶成分在过敏性哮喘发病中的作用。本项目还对肥大细胞激活后的分泌物对肥大细胞的调节进行探索，探讨肥大细胞在过敏性疾病中的作用。本课题研究共发表SCI收录论文7篇、国内核心期刊论文5篇，培养硕士研究生1名。