p66Shc在EMT过程中的功能研究

对于来源于表皮细胞肿瘤的转移一直是肿瘤细胞生物学研究的热点领域。由于信号衔接蛋白ShcA对细胞的增殖、分化和凋亡起重要的调控作用，近年来引起了广泛的关注。它有三个异构体，p66Shc，p52Shc和p46Shc，越来越多的实验证实p66Shc与肿瘤发生和转移密切相关，但详细的机理还不甚清楚。我们的工作表明p66Shc在正常表皮细胞中表达，但在转移的乳腺癌细胞、小细胞肺癌细胞中不表达，将p66Shc导入肺癌细胞后通过小鼠尾静脉注射入小鼠体内能够有效抑制肺癌细胞的转移；用小RNA干扰技术在正常表皮细胞中下调p66Shc的表达，表皮细胞表现出EMT特性。本课题将在此工作基础上继续p66Shc在EMT过程中的功能研究，期望找出p66Shc与EMT密切相关的信号途径和指标性分子，进一步揭示在肿瘤细胞转移过程中p66Shc参与的信号转导途径，为肿瘤转移的临床诊断和治疗提供研究基础。

临床上，实体肿瘤转移是造成临床患者死亡的主要原因，而对于来源于表皮细胞肿瘤的转移一直是肿瘤细胞生物学研究的热点领域之一。信号衔接蛋白ShcA对细胞的增殖、分化和凋亡起重要的调控作用，近年来引起了广泛的关注。它有三个异构体，p66Shc，p52Shc和p46Shc，越来越多的实验证实p66Shc与肿瘤发生和转移密切相关，临床肺癌组织样品中p66Shc的表达与肿瘤患者存活时间负相关，但详细的机理还不甚清楚。我们已证实信号衔接蛋白p66Shc在正常表皮细胞中表达，但在转移的乳腺癌细胞、小细胞肺癌细胞中不表达，p66Shc通过激活RhoA，抑制k-Ras活性介导失巢凋亡，在实验动物水平抑制肺癌细胞转移；在研究p66Shc调控epithelial-to-mesenchymal (EMT)过程中我们发现p66Shc与RhoGEF LARG相互作用调控细胞自噬途径，并且肺癌临床样品中p66Shc表达缺失显著影响患者存活，我们的工作还表明用小RNA干扰技术在正常表皮细胞中下调p66Shc的表达，表皮细胞表现出EMT特性，如增加的EMT markers ZEB1, Vimentin, phosphor-Smad 和降低的E-cadherin和β-catenin，同时细胞产生失巢凋亡抵抗，延缓细胞自噬的途径，提示作为关键调控蛋白p66Shc介导细胞失巢凋亡和细胞自噬性死亡途径。所以，通过探讨基于p66Shc生物学效应而进行的抑制肺癌细胞转移治疗的可行性研究，增强了对于肺癌细胞发生发展调控途径的了解，丰富对肺癌转移分子机制的认识，为肿瘤转移的临床诊断和治疗提供研究基础。