脂肪酸羟基化微生物胞内关键酶基因定点突变与辅酶NADPH代谢调控研究

利用一株经自行诱变筛选得到的将脂肪酸转化生成ω-1-羟基脂肪酸的短小芽孢杆菌Bacillus pumilus突变株（BP M-F641）；对决定脂肪酸β-氧化降解途径的关键fadD基因的定点突变，以期获得酯酰辅酶A合成酶低活性突变株，提高羟基化脂肪酸产率；在此基础上通过改变培养条件对胞内HMP途径代谢流的扰动来提高细胞内辅因子（NADPH）水平，并考察胞内NADPH水平对酶促脂肪酸羟基化反应的效应。通过对胞内脂肪酸氧化降解途径关键酶基因的定点突变和与脂肪酸羟基化相联系的NADPH水平的代谢调控的探索和认识，将使脂肪酸羟基化反应在原核微生物细胞内高效发生相关联的基因及功能和代谢调控有更确切的了解。因此本项目形成的理论具有重要的学术价值，并进一步为脂肪酸羟基化生产羟基脂肪酸高效菌株构建、关键催化反应高效率发生等提供重要的研究基础和具有普遍的指导意义。