链霉菌噬菌体和cosmid的体外包装

放线菌是一些重要的次生代谢产物的产生菌，其中特别重要的如多聚酮类和非核糖体合成多肽类药物，有抗感染、抗肿瘤、抑制免疫等多种功效。多聚酮和非核糖体合成多肽类药物由PKS和NRPS等生物合成基因簇合成，目前这些次生代谢产物的生物合成基因簇由于片段较大，都是利用大肠杆菌的体系进行克隆，然后通过杂交筛选的方式得到，尚没有一个可以直接进行功能性克隆的手段，在对这些DNA片断进行分子操作后，将它们完整地导回放线菌也并非易事，这就使我们发展放线菌自身的大片断DNA克隆系统成为必要。前期我们已经在链霉菌噬菌体克隆体系上进行了一些探索，用phiC31噬箘体cos位点缺失的溶源菌作宿主，对含phiC31 cos位点的cosmid进行了体内包装并转导到其他种类的链霉菌。本项目研究的目的，是建立提取链霉菌噬箘体包装蛋白的方法，完成链霉菌噬菌体载体和cosmid的体外包装体系，并探索其在次生代谢物筛选中的应用。