藏医白脉疗法对缺血性脑血管病大鼠神经血管单元的调节作用机制研究

Currently, cerebral apoplexy, which is hazarding health of the human beings for its high mortality and pathogenicity rates, has been a commonly and frequently encountered disease. Ischemic cerebrovascular disease is one of the most common types. This task combines the former study foundations, conform the theory of traditional Tibetan medicine, aim at features of pathogenesis and pathological features of the "Long" imbalance, choose the therapeutic "Baimai"therapy, adopt plug thread method to blunting rat's arteria cerebri media(to interpret the making method of local cerebral ischemic model to build the models of rats with ischemic cerebrovascular disease and focusing on the notch classic signal conduction path and glia inflammatory reaction, choose hippocampus dentate gyrus related to neurovascular regeneration, apply the techniques including the behavior science, Realtime-PCR,immunofluorescence methods and Westernblot to explore the potency mechanism and main factor related to Tibetan medicine from entirety-tissue-molecule and so on, which provides identifiable ground for clarifying the possible effective mechanism of applying Baimai therapy to ischemic cerebrovascular disease and enlarging the clinic application range of the Baimai therapy.

脑卒中目前在我国已成为一种常见病、多发病，以其高死亡率和和高致残率严重的危害着人类健康，而缺血性脑血管病是其中最为常见的类型之一。本课题结合前期研究基础，遵循传统藏医理论，针对该病"隆"失调的病机特点的病理特点，择取确有疗效的藏医白脉疗法，、采用国际通用的脑中动脉线栓法复制局灶性脑缺血模型制作方法，建立缺血性脑血管病大鼠模型，以Notch经典信号传导通路及胶质细胞炎症反应为核心，选择有关神经血管再生的系关键脑区海马齿状回及，应用行为学、Realtime-PCR、免疫双染、Westernblot等技术，从整体--组织--分子等的不同角度，探究有关藏药的药效机制与调节靶点，为阐明藏药白脉疗法法治疗缺血性脑血管病的可能疗效机制，推广藏医白脉疗法在临床中的使用范围提供依据,更为缺血性脑血管病的临床治疗提供新的可选方案。

目的：比较研究藏医白脉疗法治疗缺血性脑血管病的疗效以及其可能的作用机理。方法：脑中动脉线栓法复制局灶性脑缺血模型大鼠，采用免疫组化等多种生物学研究方法, 评价藏医白脉疗法的疗效。结果：TTC染色模型组梗死区脑组织呈苍白色，并且随着再灌注时间的延长可见梗死区扩大，白脉疗法组的脑梗死体积小于模型组，且14天时与模型组比较有显著性差异，P< 0.05；HE染色表明白脉疗法组脑缺血大鼠皮层神经元的损伤程度低于模型组；在缺血再灌注损伤后7d，白脉疗法组、如意珍宝丸组GAP-43阳性细胞表达均高于模型组， P< 0.05；各个治疗组大鼠脑缺血侧皮层的VEGF1阳性细胞表达高于假手术组、模型组和阳性组，P< 0.05；白脉软膏组VEGF1阳性细胞表达高于其他各组，P< 0.05；白脉疗法组VEGF1阳性细胞表达高于假手术组及模型组，P< 0.05。白脉疗法组、白脉软膏组与如意珍宝丸组较模型组CD34表达显著增加，P<0.05；白脉疗法组相对于阳性对照组CD34增加明显，P<0.05。14d假手术组、阳性组、白脉软膏组各组GAP-43阳性细胞表达较7d均有所增加，其余三组稍有下降，阳性组和白脉疗法组GAP-43阳性细胞表达高于假手术组，P< 0.05；白脉疗法组GAP-43阳性细胞表达高于模型组。各组VEGF1阳性细胞数7d时的表达低于白脉软膏组， P< 0.05。术后14d，与模型组相比，白脉疗法组CD34明显增加， P<0.05；白脉疗法组相较于白脉软膏组有明显差异,P<0.05。7天时如意组Hes1和Jagged1的mRNA表达量显著性高于其他各组(P<0.05)，7天时各缺血再灌注组Hes1的mRNA的表达量高于假手术组，14天时除白脉疗法组各缺血再灌注组Hes1mRNA的表达量低于假手术组。7天时各缺血再灌注组Jagged1的mRNA的表达量高于假手术组，14天时均低于假手术组。结论：藏医白脉疗法可以减轻模型大鼠脑梗塞灶，减轻肢体功能障碍，其可能机制是能通过促进脑缺血再灌注大鼠GAP-43、VEGF1及Notch信号通路来调节脑缺血后SGZ 区的神经再生过程，促进微血管增生，诱导微血管网的再建，起到神经保护的作用。. 上述研究成果发表学术论文9篇，会议论文3篇。 培养培养西部访问学者 1 人，青年教师4 名。 培养硕士、博士研究生5人。