细胞外信号调节激酶ERK通路在大麻素受体激动剂WIN55，212-2心肺复苏后脑保护作用中的调控机制研究

Cerebral ischemia/reperfusion, as one of the important factors, result in short survival after cardiopulmonary resuscitation (CPR). multiprotection will improve susvival.We demonstrated cannabinoid receptot agonist WIN 55212-2 [4,5-Dihydro-2-methyl-4(4-morpholinylmethyl)-1-(1-naphthalenylcarbonyl)-6H-pyrrolo[3,2,1-i,j]quinolin-6-one] induced hypothermia after CPR, improved the neurologically function and prolonged survival. WIN55,212-2 was antiinflammatory and antiapotosis as well, which was related with it's receptor activting extracellular signal-regulated kinase (ERK). Therefore, we hypothesized WIN55,212-2 might improve neurologic function via other mechanism including hypothermia after CPR. In this project, we will establish cardiac arrest (CA) model in rat, to investigate the effect of WIN55,212-2 under normothermia after CPR. And animals will be treated with CB1 or CB2 antagonist or inhibitor of extracellular signal-regulated kinase(ERK),we will observe whether the neuroprotection effect of WIN55,212-2 is regulated by the progression of CB1 receptor-mediated ERK activation after CPR. The results will provide a new thought for cerebral protection after CPR.

脑缺血再灌注损伤是导致心肺复苏（CPR）后远期存活率下降的重要原因之一，多种脑保护措施的综合干预有助于改善预后。我们前期研究发现大麻素受体激动剂WIN55，212-2在心肺复苏后可诱导低温并改善大鼠的神经功能。药理研究显示WIN55，212-2还具有抗炎、抗凋亡等作用，有利于减轻缺血再灌注损伤，其作用可能与受体激活细胞外信号调节激酶（ERK）有关。因此，我们设想该药除低温效应外还可能通过其它作用改善心肺复苏的预后。本研究拟在前期研究的基础上，建立大鼠心脏骤停模型，通过用物理方法阻断WIN55，212-2的低温效应，，观察其在CPR后是否仍具有神经保护功能，并应用大麻素受体拮抗剂及ERK抑制剂，观察受体效应、ERK通路的激活、与其相关的大脑细胞凋亡及DNA修复情况，探索WIN55，212-2是否通过其受体激活ERK通路介导神经保护作用。研究将为该类药物应用于心肺复苏后脑保护提供一条新思路。

随着心肺复苏技术的提高，心脏骤停患者的自主循环率显著提高，但其远期生存率仍无法得到明显改善，相当一部分患者因为复苏后脑损伤而死亡。研究表明，亚低温治疗可显著改善预后，但诱导低温的方式、诱导时间、维持时间等等这些问题仍待解决。目前多数诱导低温的方式为物理低温，如冰毯、冰盐水等。这些降温方式均是通过外周神经刺激反射体温中枢达到降温目的。研究表明，大麻素受体激动剂WIN55, 212-2可通过中枢作用CB1受体诱导低温。且该药物在心肺复苏后可诱导低温并改善大鼠神经功能，但其受体作用通过何种路径来实现其脑保护作用仍不清楚。而且药理研究显示WIN55, 212-2除了有诱导低温作用外，还具有抗炎、抗凋亡等作用。而在心肺复苏后这些作用机制是否存在尚未见有文献报道。因此，我们设想该药物除了诱导低温还可能通过其它作用减轻脑损伤。本研究通过建立动物心脏骤停模型，应用CB1、CB2受体拮抗剂、ERK抑制剂以及以物理方法阻断WIN55, 212-2低温效应后观察WIN55, 212-2的疗效。同时从器官、分子水平探讨其作用机制。结果显示：1.在心肺复苏后，WIN55, 212-2诱导药物性低温是通过CB1受体实现，而且其可显著减轻神经细胞凋亡和病理损伤。2.WIN55, 212-2在心肺复苏后可能通过ERK信号通路调控凋亡相关蛋白而减少凋亡。3. WIN55, 212-2在心肺复苏后通过CB1受体激活ERK通路进而保护神经功能。4.心肺复苏后，拮抗WIN55, 212-2的低温效应后其神经保护作用消失。5. 在大鼠心肺复苏中，药物性低温与物理低温的复苏疗效相当。另外，研究还发现，WIN55, 212-2在心肺复苏后可减轻炎症反应。因此，本课题研究基本明确WIN55, 212-2在心肺复苏后保护神经功能主要是通过其低温作用实现的。而这一作用是通过其CB1受体激活ERK信号通路介导的。研究结果将为今后提高心肺复苏疗效提供一条新的途径机制研究基础。