hsa-miR-26a“微调”绒毛外滋养细胞（EVTs)侵袭行为及机理研究

绒毛外滋养细胞（EVTs）节制性侵袭母体子宫内膜是胚胎着床和胎盘血管形成的关键。侵袭不足可导致子痫前期-子痫、自然流产等疾病。我们前期通过miRNA-array筛选正常与流产EVTs差异表达miRNAs，并进行qRT-PCR验证，原位杂交及初步功能实验，发现hsa-miR-26a可能通过下调Wnt信号通路相关基因表达来"微调"EVTs增殖与侵袭能力，增加流产风险。.本研究拟进一步对hsa-miR-26a进行gain of function和loss of function研究，建立其过表达及抑制的细胞模型，检测细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭行为变化；western-blot及2-DE筛选候选靶基因；并对靶基因进行克隆确证及体内功能研究。以期从分子、细胞、动物水平阐明hsa-miR-26a的功能，确定其调控EVTs的靶基因，及其对EVTs侵袭行为的"微调"机制，为自然流产的发生机理寻找新的线索。

本项研究通过建立稳定表达Hsa-miR-26a的细胞株JEG3，发现Hsa-miR-26a引起的细胞行为改变是细胞增殖能力没有明显改变，而细胞凋亡减少；细胞迁移和侵袭能力增强。进一步探索其机制发现转染Hsa-miR-26a以后，蛋白质谱鉴定出数种Hsa-miR-26a潜在靶基因的蛋白水平发生不同程度的变化。我们通过双荧光素酶报告基因系统验证发现Hsa-miR-26a对质谱鉴定出的一个蛋白糖原合成酶激酶-3 (GSK-3β)其基因3’UTR 有调控作用。已有的研究表明，在上皮干细胞中GSK-3β可以调控靶基因ACF7的磷酸化而影响细胞的迁移能力。因此，通过本项研究，我们认为Hsa-miR-26a可能通过影响GSK-3β的表达水平“微调”绒毛外滋养细胞的迁移与侵袭能力。该项研究已按预期完成相关内容，相关论文正在撰写中。