花椒麻素对细胞阳离子流的影响及其调节体内脂质代谢的机理研究

花椒是我国传统中药和重要的香辛料，食用人群逐年增加。近年来，花椒作为经济作物规模化栽培量猛增。花椒麻素是花椒中最具特色的风味成分(麻味)和药用功能成分，然而对其生理功能性研究严重不足。本项目通过动物实验（正常实验鼠和TRPV1、TRPA1基因敲除实验鼠对比）和细胞培养（分别用TRPV1、TRPA1抑制剂）方式，系统研究花椒麻素激活TRP通道调节细胞内Ca2+、K+、Na+等阳离子流的效果，以及花椒麻素剂量、食用期限、膳食组成等对体内脂质吸收代谢的影响效果，并通过检测肝脏中TRPV1、TRPA1、FAS、ACAT、CYP7A1、SREBP、FAX等与脂质代谢相关基因以及小肠黏膜上的ACAT2、TRPV和IBABP等与脂质吸收相关基因的mRNA表达的影响，以及肠黏膜细胞、肝脏细胞中阳离子流量变化，探讨花椒麻素影响体内脂质代谢的分子机理。本项目的研究可为花椒的精深加工利用和健康消费提供理论依据。

花椒是我国传统中药和重要的香辛料，食用人群逐年增加。近年来，花椒作为经济作物规模化栽培量猛增。花椒麻素是花椒中最具特色的风味成分(麻味)和药用功能成分，然而对其生理功能性研究严重不足。本项目通过动物实验（正常实验鼠和TRPV1、TRPA1屏蔽实验鼠对比）和细胞培养（分别用TRPV1、TRPA1抑制剂）方式，系统研究花椒精中降血脂主体成分花椒麻素激活TRP通道调节细胞内Ca2+离子流的效果，以及花椒麻素剂量、食用期限对不同高脂模型（雌激素缺乏型、高脂膳食型、糖尿病模型）大鼠体内脂质吸收代谢的影响效果，采用RT-PCR、west-blot、人肝细胞培养等技术从分子营养学角度研究花椒麻素对肝脏中HMG-CoA还原酶、TRPV1、TRPA1、CYP7A1、SREBP、FXR等与脂质代谢相关基因以及小肠黏膜上的TRPV和IBABP等与脂质吸收相关基因的mRNA表达的影响，以及花椒麻素对肝脏细胞中Ca2+离子流量的影响，TRPV1、TRPA1在花椒麻素生理功能中的介导作用，进而探讨花椒麻素影响体内脂质代谢的分子机理。.研究结果表明，花椒精对高脂血症大鼠血脂、肝脂有降低效果，其中起关键作用的是花椒麻素，建立了花椒精中分离花椒麻素的快捷提取方法，提供研究所需高含量（97%）的花椒麻素：羟基-β-山椒素和羟基-γ-山椒素。花椒麻素对高脂膳食和雌激素缺乏诱导的高脂血症都有明显的降低效果，降低了血浆、肝脏中TC、TG浓度，并且表现出明显的剂量效应。动物在体和细胞培养实验证明，花椒麻素在回肠、空肠吸收进入肝脏，激活肝细胞中辣椒素受体TRPV1，增加细胞中Ca2+离子流量，抑制肝细胞中HMG-CoA还原酶、SREBP-2、FXR、CB1，从而降低肝细胞胆固醇合成，花椒麻素抑制回肠中胆汁酸回流泵ASBT和IBABP，降低肠肝循环中胆汁酸的回流，增加粪便中胆汁酸和中性固醇排出，刺激肝细胞CYP7A1将肝脏胆固醇合成更多胆汁酸，供应肠道胆汁酸池的需求，从而降低体内血浆和肝脏中胆固醇浓度。通过TRPV1、TRPA1抑制剂对大鼠、HepG2 细胞作用，证明了辣椒素受体TRPV1在花椒麻素调节肝脏胆固醇代谢起关键作用。.研究发现，花椒麻素与辣椒素具有相似的降血脂功效与机理，二者协同作用可降低使用剂量。花椒麻素还具有促进肝癌细胞凋亡的作用。本项目的研究结果可为花椒的精深加工利用和健康消费提供理论指导。