姜黄素(PPARγ天然激活剂)纳米乳粒和载PPARγ基因支架的应用防治颈动脉支架后再狭窄的实验研究

血管内支架介入治疗在降低脑卒中发病率方面起到了积极作用，但支架内再狭窄是困扰介入治疗的主要瓶颈之一。在前期实验的基础上，复习相关文献我们提出一种新的假说：姜黄素能够通过激活PPARγ而发挥防治动脉支架内再狭窄的作用，同时PPARγ可以作为一种新的治疗基因用于基因携载支架防治动脉支架内再狭窄(上述推测的立论依据是：既往研究表明PPARγ和调控炎性反应、抗血管平滑肌细胞增殖、保护血管内皮细胞有关，而血管内支架再狭窄与上述三面有重要关系)；姜黄素因为存在难溶于水及吸收差和生物利用度差的弊端，在实验中首先对姜黄素的剂型进行新的改造，利用自乳化技术制作出姜黄素纳米乳粒，然后研究其药效学；制作抗体偶联载PPARγ基因质粒DNA支架。利用中国贵州小型猪制作颈动脉粥样硬化狭窄模型，分析携载PPARγ基因支架及姜黄素纳米乳对血管支架内再狭窄的影响，二者联合应用能否发生协同效用，为姜黄素的应用提供理论依据

在国家自然科学基金项目(课题编号：81173595)资助下，课题组按照提交计划书的内容进度完成了所有的研究任务，总结如下：. 构建了PPARγ激动剂筛选细胞模型，利用该模型不仅了验证了姜黄素为PPARγ天然激动剂，同时该细胞模型为其他学者筛选PPARγ天然激动剂提供了重要的验证工具。观察到姜黄素能够降低高血压大鼠颈动脉中膜的病理重构，提示姜黄素在动脉粥样硬化的防治中具有一定的应用前景。观察了280例颅外脑血管狭窄的血管内支架成形术的疗效，结果提示血管内支架成形术是防治颅外脑血管狭窄患者缺血性卒中有效且安全的方法，但的确存在支架后再狭窄现象。建立了姜黄素的HPLC测定方法，对姜黄素自乳化给药系统进行了研究及评定，成功制作了消除缓慢的姜黄素亚微乳制剂。利用球囊扩张技术成功建立了中国贵州小型猪颈动脉粥样硬化模型，观察了病理形态学。利用三种模型(活体脑缺血大鼠动物模型、自发性高血压大鼠颈动脉粥样硬化模型、氧糖剥夺后原代皮层细胞神经元模拟脑细胞缺血后的病理现象模型)比较了姜黄素纳米乳粒剂型及普通姜黄素剂型二者的疗效差异及吸收效果差异，实验研究发现,两种姜黄素剂型在脑缺血损伤模型疗效及动脉粥样硬化模型疗效方面和对氧糖剥夺后原代皮层细胞神经元病理过程中均存在调节作用，但姜黄素纳米乳粒剂型较普通姜黄素剂型在治疗上述疾病时具有用量少以及吸收率和疗效明显改进的优点,利用荧光标记技术，提示姜黄素纳米乳粒剂型具有靶向集中的分布特点。观察了支架植入对于颈动脉血管壁结构变化的影响，研究发现支架植入后可以诱导血管再狭窄事件发生的真实存在性，同时提示导致支架后再狭窄的因素涉及到中层血管平滑肌细胞增殖及内膜的过度增殖等因素，这和我们前期整理发表的临床研究是相符的。和北京化工大学材料科学与工程学院及中国医学科学院药物研究所合作，制备了PPAR γ携载基因支架，目前正在申报专利。利用成功制作的小型猪颈动脉粥样硬化模型,观察了携载PPARγ 基因支架和裸支架对ISR的影响，结果表明携载PPARγ基因支架可加速支架后再内皮化，同时减少了支架后再狭窄的发生，该发现为减少支架后再狭窄提供了一个新的选择策略。. 上述研究结果，部分数据已经整理发表，截止2016年2月19日，已发表SCI收录论文5篇，发表CSCD收录中文3篇，其余论文陆续整理发表中。