Necroptosis诱导剂的分子靶标鉴定

肿瘤化疗往往因肿瘤的抗药性而失败。常规临床化疗药不可避免也无法克服肿瘤的耐药性，这是肿瘤化疗的关键难题。因此，肿瘤化疗急需能克服肿瘤耐药性的药物、技术、和方法。我们在国际上率先报道诱导necroptosis的小分子有可能发展成治疗耐药肿瘤的新型药物、并系统提出了用诱导肿瘤necroptosis来治疗耐药肿瘤的概念。然而，这些小分子的靶点不清。我们前期用固相necroptosis小分子亲和层析技术获得细胞内与之特异结合的蛋白质并已用质谱鉴定。本课题的主要研究为：（1）用分子生物学技术调控细胞内的上述蛋白质的表达，观察细胞对necroptosis敏感性的变化，确证参与necroptosis的关键蛋白质；（2）参与necroptosis的关键因子之间的相互作用。本研究将为necroptosis诱导剂治疗耐药肿瘤提供必要的理论依据，也将对necroptosis的基本生物学的本质有进一步的认识。

肿瘤化疗往往因肿瘤的抗药性而失败。常规临床化疗药不可避免也无法克服肿瘤的耐药性，这是肿瘤化疗的关键难题。因此，肿瘤化疗急需能克服肿瘤耐药性的药物、技术、和方法。我们在国际上率先报道诱导necroptosis的小分子有可能发展成治疗耐药肿瘤的新型药物。然而，这些小分子的靶点不清。我们在本课题的资助下，鉴定了necroptosis诱导剂的代表分子紫草素的分子靶点。我们发现，紫草素的一个重要靶点是肿瘤细胞内的M2型丙酮酸激酶（PKM2）。PKM2在肿瘤的糖代谢中起了非常重要的作用，而糖代谢处于肿瘤细胞代谢的中心位置。肿瘤细胞的糖酵解速率非常高，快速利用葡萄糖，产生能量和生物合成所需的中间代谢物。PKM2在其中起了一个非常重要的作用。PKM2已被认为是一个治疗肿瘤的靶点。我们的证据说明，紫草素是一个PKM2的抑制剂，其抑制PKM2的IC50为0.5 M，为哈佛大学Cantley研究组报道的PKM2抑制剂compound3的1%，因此其抑制PKM2的效率是compound3的100倍。紫草素能有效杀死肿瘤细胞，尤其是能有效杀死抗药的肿瘤细胞，其机理可能与紫草素能有效抑制PKM2有关。我们同时鉴定了一系列的紫草素的同系物也是PKM2的抑制剂。此外我们发现维生素K3和K5也是有效的PKM2的抑制剂。..在本课题的资助下，我们发表了8篇论文，分别发表在Oncogene，J Pathol，Biochem Pharmacol, PloS One, Cancer Lett.。. .需要进一步研究的问题。虽然紫草素及其同系物能有效抑制PKM2，抑制肿瘤糖酵解，但其对细胞内的代谢的一些问题并不清楚。我们认为，PKM2只是紫草素的一个重要靶点，PKM2可能还影响肿瘤细胞内其他的重要代谢过程，如线粒体代谢。