CLEC-2 N-糖基化修饰的鉴定及其对生物学功能的影响

CLEC-2是最新鉴定的C型凝集素受体超家族中一员，在血小板和巨核细胞表面高丰度表达，与配体结合，能诱导血小板聚集、促进肿瘤细胞迁移和HIV感染。我们前期研究发现：不同糖基化修饰形式的CLEC-2具有不同的配体结合能力，糖基化修饰与CLEC-2功能密切相关。因此，CLEC-2糖基化鉴定和功能研究非常必要。本项目旨在通过前期我们建立的糖链结构解析技术平台和有效的糖基化修饰生物质谱鉴定方法，进一步发展完整糖肽生物质谱鉴定新方法，研究CLEC-2受体的糖基化修饰，阐释糖链对CLEC-2功能的影响，并研究可能的糖基化修饰的调控机制；从而获得CLEC-2的糖基化位点特异的糖链结构信息，阐明糖链结构和功能关系。深入研究CLEC-2的功能和糖链结构基础，有助于我们更好的理解CLEC-2生物学功能，对了解血小板相关疾病的发生发展具有显著意义，并为CLEC-2作为血小板相关疾病的诊断指标和治疗靶点奠定基础。

CLEC-2是最新鉴定的C型凝集素受体超家族中一员，在血小板和巨核细胞表面高丰度表达，与配体结合，能诱导血小板聚集、促进肿瘤细胞迁移和HIV感染。我们前期研究发现：不同糖基化修饰形式的CLEC-2具有不同的配体结合能力，糖基化修饰与CLEC-2功能密切相关。因此，CLEC-2糖基化鉴定和功能研究非常必要。本项目通过完善前期我们建立的糖链结构解析技术平台和有效的糖基化修饰生物质谱鉴定方法，进一步发展完整糖肽生物质谱鉴定新方法，获得了CLEC-2受体的糖基化修饰信息，并对CLEC-2分子性质和功能开展了较深入的研究。我们的研究发现人CLEC-2可溶性片段的产生是一个依赖于N-糖链的可调节过程，而可溶性片段的研究对相关疾病的早期诊断和预后有一定的指导意义。同时，针对CLEC-2受体糖链鉴定发展的糖肽生物质谱鉴定新方法，进一步成功发展应用于了另一种C型凝集素受体LOX-1的糖基化修饰信息。因此在该项目资助下，我们建立和完善了糖生物学研究的技术平台，特别是建立了有效的微量（微克级）糖蛋白糖链解析方法，在糖链结构和功能分析这一国际性难题上取得了一些突破，获得了国内外同行的肯定，为提升我国糖生物学领域的研究水平作出了一定贡献。