Jagged2high CD11bhigh 调节性树突状细胞防治cGVHD的实验研究

树突状细胞（DC）活化供者T细胞是触发慢性移植物抗宿主病（cGVHD）的主要环节。调节性DCs（DCregs）因低表达MHC、不表达共刺激分子而具有致免疫耐受性，在移植免疫耐受中发挥重要作用。传统方法所获DCregs易受刺激向成熟DC转化，而丧失持久的致免疫耐受性。Jagged基因表达是DCregs分化的关键信号，间充质干细胞诱导Notch配体Jagged2 高表达的DCsregs可在体内继续扩增，保持对特异性抗原的持续免疫耐受作用。本研究以cGVHD-EL9611小鼠模型为对象，通过间充质干细胞诱导产生Jagged2及CD11b高表达的DCregs，并通过siRNA阻断MSC-DCregs 表达Jagged2，探讨Jagged2基因在DCregs诱导和维持免疫耐受中的可能机制，观察其对cGVHD的预防和治疗作用，为临床cGVHD防治提供新的策略。

本项目通过MSC体外成功诱导CD8α+优势DC成为Jagged2highCD11bhigh调节性树突状细胞（Jagged2highCD11bhighMSC-DCregs）。证明Jagged2highCD11bhigh MSC-DCregs具有低免疫原性和免疫调节性，吞噬功能增强，抑制淋巴细胞增殖，调控Th17/Treg平衡，其机制可能与激活Notch信号通路相关。成功建立小鼠急性移植物抗宿主病（aGVHD）及两种慢性移植物抗宿主病（cGVHD）模型，为临床GVHD研究提供了关键的活体工具。CB6F1(H2bxd) →BALB/c(H2d)小鼠模型成功模拟临床cGVHD特点，建模效率高，重复性好，特别是肺部、皮肤的典型病理改变，国内外尚无相同报道，已申请发明专利，具有良好的应用前景。B10.D2（Hc1H2dH2T18c）→BALB/c(H2d)小鼠皮肤型cGVHD模型，成模周期短，建模效率高，重复性好，国内尚未见报道。完成Jagged2highCD11bhighMSC-DCregs防治GVHD动物模型的体内研究，其初步显示出减轻aGVHD及皮肤型cGVHD严重程度、延缓aGVHD模型死亡时间的作用，但该作用可能需在发病后，多次输注得以维持。本项目临床部分达到国际先进水平，MSC治疗难治性cGVHD的相关研究已发表在Bone Marrow Transplantation，引起同行的高度关注，国际著名专家O. Ringden为此文作了述评，至2013年2月15日，本文被引用达50次。MSC通过下调Jagged2基因治疗难治性cGVHD的临床研究，进一步揭示了Notch信号通路与cGVHD的相关性。本项目所揭示的MSC与DC相互作用的机制，具有一定的科学价值；同时也为临床防治GVHD提供了实验依据，具有一定的社会意义及潜在的应用前景。本项目已发表SCI收录论文4篇，接受1篇；国家核心期刊论文6篇，国内外会议论文6篇。培养博士毕业生1名、硕士毕业生1名（获得南方医科大学优秀毕业生），在读博/硕士生各1名；培养中青年学术带头人1名，指导其完成本项目相关的省自然科学基金项目一项（编号：10151008004000024）。本项目中有关Th17/Treg平衡改变的研究及cGVHD动物模型为下一个国家自然科学基金项目（编号：81270648）奠定了基础，是cGVHD研究方向的延续。