补体C5a参与败血症免疫抑制的机制研究

各种原因导致的败血症严重威胁人们的生命健康。败血症的致病过程主要包括初期的急性、过度炎症反应以及此后由于抑制性Treg细胞活性增强，T效应细胞的大量凋亡导致的免疫抑制、免疫瘫痪。败血症过度炎症反应与免疫抑制之间的关系目前尚不十分清楚。为深入认识败血症的致病机理，寻求新的干预策略，本项目在前期研究发现败血症关键炎症介质- - -补体C5a参与免疫抑制,且该过程与DC细胞功能相关的基础上，拟对其致病机理提出以下假设：1）补体C5a通过改变DC抗原呈递细胞的功能、表型引起体内抑制性T细胞亚群的极化增强；2）补体C5a通过激发氧自由基、细胞因子等大量释放，改变体内炎症介质网络平衡，T细胞凋亡相关的炎症介质活性升高导致效应性T细胞的大量调亡。在明确上述机制的基础上，本项目还将筛选、验证针对人C5a的新型拮抗剂及中和性单抗在防治败血症免疫抑制中的作用，为针对C5a靶点的败血症干预策略奠定理论及实验基础。

本项目的目标任务为：通过探讨炎症介质、抗原呈递细胞表型变化与免疫抑制三环节之间的关系，阐明脓毒血症的病理机制，最终为该类致命性炎症反应综合征的监测及干预提供理论及实验依据。.截至目前已经发表标有本项目资助号的SCI研究论文12篇；申请国家发明专利1项，申请国际发明专利（PCT）1项；参加免疫学大会并做学术交流4次；培养研究生5名；完成了课题的目标任务。.在本项目中我们发现中和脓毒血症小鼠体内补体C5a的活性后，腹腔DC细胞表达IL-12的水平升高，提示过高的补体C5a可能通过影响抗原呈递细胞的功能最终引发免疫抑制（Ma N…, Han G, et al. Plos ONE. 2013）。在探讨抗原呈递细胞功能及表型的过程中，我们发现Tim-3是一个关键的调控点，随着脓毒血症炎症反应的发生C5a大量释放，随后C5a上调抗原呈递细胞上Tim-3的表达，而后者一方面抑制抗原呈递细胞如巨噬细胞的活性（Yang X,…Han G，J.Immunol, 2013; Han G, et al. Front Immunol, 2013）; 另一方面抑制Th1、Th17细胞以及M1型巨噬细胞活性，促进T细胞向具有免疫抑制功能的Th2、M2方向极化（Zhao Z, …Han G. Clin Exp Immunol, 2014; Shi F,…Han G. Clin Immunol 2012；Jiang X,… Han G. Clin Immunol 2015）。因此本项目的主要亮点工作是鉴定出一个新的，受炎症介质（C5a等）调控的免疫检查点分子—Tim-3。.我们在脓毒血症患者临床样本中证实了Th细胞亚群失衡与免疫抑制的关系（Li J, …Han G, et al. Inflammation, 2015）；研发了人可溶性Tim-3检测试剂盒，检测发现人血浆Tim-3水平的变化对脓毒症休克的预警及预后有诊断价值（Ren F,…Han G, XieL. Tissue Antigen, 2015）。另外我们研制的抗人C5a抗体也显示出良好的中和活性及应用前景，并在此基础上申请了国家新药创制重大专项军特药项目（课题编号：2014ZX09J14105-04B）。基于上述研究成果，我们申请国家发明专利1项（201410036781.X）；同时申请国际发明专利1项（PCT/CN2015/00003