神经病理性疼痛大鼠脊髓后角神经元α2受体上调的实验研究

由外周神经损伤或病变引发的慢性神经病理性疼痛是一种常见的疼痛综合症，对患者的生活质量造成了深刻的负面影响。α2受体激动剂可乐定等已经在临床上用于神经病理性疼痛的治疗，疗效优于对正常动物诱发急性疼痛的抑制作用，但是内在机制尚不明确。我们前期的研究发现脊髓后角浅层神经元出现一系列兴奋性增高的改变，并且可被去甲肾上腺素等α受体激动剂所抑制，该抑制作用可被α2受体拮抗剂阻断。由此我们推测神经病理性疼痛中后角神经元电生理改变与慢性疼痛的发生发展紧密相关，α2受体激动剂对疼痛良好抑制作用的机制在于：在慢性疼痛长时程反复刺激下神经元出现了α2受体上调。本研究拟结合全细胞膜片钳和RT-PCR技术，对慢性坐骨神经压迫模型大鼠脊髓后角浅层离体神经元电生理特性进行描述，并寻找神经元细胞膜和细胞内容物α2受体上调的证据，从而解释α2受体上调可能是造成α2受体激动剂对慢性神经病理性疼痛和急性疼痛疗效差异的内在机制。

由外周神经损伤或病变引发的慢性神经病理性疼痛是一种常见的疼痛综合症，对患者的生活质量造成了深刻的负面影响。α2 受体激动剂可乐定等已经在临床上用于神经病理性疼痛的治疗，疗效优于对急性疼痛的抑制作用，但是内在机制尚不明确。本项目首先通过Western Blot和RT-PCR的方法，分别从RNA和蛋白的水平检测了神经病理性痛大鼠和正常大鼠脊髓背角α2肾上腺素受体三个亚型（α2A，α2B和α2C）的表达，结果发现在蛋白表达水平，神经病理性痛大鼠脊髓的背角主要是α2A肾上腺素受体的蛋白表达出现了下调，而RNA水平，三个亚型均无明显变化。为了进一步验证α2肾上腺素受体三个亚型在神经病理性痛中的不同作用，我们通过在体胞外电生理记录和鞘内给药的方法，记录SNI大鼠脊髓表面给予α2肾上腺素受体三个不同亚型的激动剂和拮抗剂对脊髓背角广动力范围神经元（WDR）诱发放电和α2肾上腺素受体特定亚型激动剂对SNI大鼠50% 缩足阈值的影响，结果发现只有α2A肾上腺素受体激动剂可以显著地抑制WDR神经元的诱发放电，而这种抑制作用可以被α2A-肾上腺素受体拮抗剂逆转，而α2B、α2C-肾上腺素受体激动剂和α2C-肾上腺素受体拮抗剂对WDR神经元的诱发放电均无明显的影响。进一步，鞘内给予α2A-肾上腺素受体激动剂可以显著的提高SNI神经病理性痛大鼠50%缩足阈值。通过以上实验，本项目分别从表达和功能两个方面验证了，在神经病理性痛条件下，α2-肾上腺素受体对神经病理性痛的调节作用主要是通过α2A-肾上腺素受体亚型而起作用的，这为我们进一步的深入研究其具体的分子生物学机制打下基础。并且通过对α2受体不同亚型在神经病理性痛条件下的表达和对不同亚型镇痛机制的深入研究，可以预见通过合成针对α2-AR特异性亚型的高选择性的激动剂可以产生更强的镇痛效果并减少非选择性α2-AR激动剂具有的心动过缓、低血压和过度镇静等不良反应。