基于多模式色谱-质谱的多基原秦皮溯源信息成分获取研究

The project is planned to establish an approach on obtaining the traceability information of multisource TCM Fraxini Cortex based on multi-modal chromatography combined with mass spectrometry. Through high performance thin layer chromatography (HPTLC) combined with QDa compact mass spectrometry and ultra high performance liquid chromatography (UHPLC) combined with Orbitrap high-resolution mass spectrometry, using UNIFI information platform, Fraxini Cortex all components-characteristic information database will be constructed. On this basis, through the multi batch of Fraxini Cortex collected and determined by the base source, using chemometrics method to evaluate, through the differential characteristic components of different source of Fraxini Cortex, which will help to obtain the characteristic information to traceability analyses. Its core is through the expansion of traceability data content and the establishment of the system analysis model building Cortex fraxini effective traceability index system, finally, which will provide scientific basis to construction of the quality traceability system of multisource TCM Fraxini Cortex, and ensure the safety and effectiveness for clinical use.

本课题拟基于多模式色谱-质谱技术，进行多基原秦皮溯源信息成分获取研究。通过高效薄层色谱（HPTLC）和QDa紧凑型质谱联用技术与超高效液相（UHPLC）和Orbitrap高分辨质谱联用技术相结合，借助UNIFI信息平台，建立秦皮全成分-特征信息库。在此基础上，通过对收集的多批次基源确定的秦皮药材，采用化学计量学方法进行评价，通过不同基源秦皮的差异特征成分，获取可用于溯源分析的特征信息成分。本项目核心是通过溯源数据内容拓展和系统分析模型的建立，建立秦皮有效溯源指标体系，最终为多基源中药秦皮质量溯源体系建立提供科学依据，保证用药安全有效。

本课题针对目前多基源秦皮溯源信息的不足，基于多模式色谱-质谱技术，进行了多基原秦皮溯源信息成分获取研究。.（1）通过超高效液相和高分辨质谱联用技术相结合，借助UNIFI信息平台，对秦皮进行化学成分表征，建立相关化学成分数据信息库。.（2）通过在254nm和衍生化后日光下检视的薄层色谱图可直观地将秦皮4种基原药材及其4种混淆品加以鉴别。用薄层色谱结合ChemPattern软件将秦皮2种基原药材（白蜡树、苦枥白蜡树）和3种混淆品（水曲柳、美国红梣和胡桃楸）薄层图谱转化成色谱峰。选择衍生化后日光下检视的薄层色谱图进行化学计量学分析，发现MANOVA方法能够将5种药材区分开来。薄层扫描技术与SPSS软件相结合，采用人工神经网络分析方法对5种药材进行建模，并对所建模型进行了验证和应用，发现所建立的模型预测准确率较高。.（3）秦皮的3种混淆品水曲柳、美国红梣和胡桃楸与秦皮UHPLC指纹图谱色谱峰轮廓差异明显，可将三者与秦皮直观加以区分。秦皮四种基原药材指纹图谱相似度较高，因此通过化学计量学进行分析，PCA分析可将四者进行区分，OPLS分析白蜡树与苦枥白蜡树的差异成分，找到二者主要差异性成分，其中秦皮甲素/秦皮苷的含量是区分白蜡树与苦枥白蜡树的一个重要指标。.（4）采用一标多测技术，以秦皮甲素为一标，同时测定了秦皮中秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷和秦皮素4个成分的含量，初步建立了秦皮的多成分含量测定方法, 并对校正因子和相对保留时间进行了研究。.综上所述，本研究在化学成分表征的基础上，构建基于高效薄层色谱、超高效液相和高分辨质谱联用技术相结合的质控分析策略，建立基于多模式色谱指纹图谱的特征专属定性鉴别方法及一标多测的多成分同步定量分析方法。通过对收集的多批次基原确定的秦皮药材进行测定，采用化学计量学方法进行评价，找到不同基源秦皮的差异特征成分，获取可用于溯源分析的特征信息成分。通过本研究为多基原中药溯源信息成分的获取提供研究方法借鉴。