激光照射对中华大蟾蜍早期胚胎基因表达状态的影响及其信号转导途径的初步研究

激光照射中华大蟾蜍早期胚胎，原子力扫描显微镜观察一定激光照射前后细胞膜表面分子的分布变化，初步确定光敏蛋白在膜上存在与否；采用双向电泳技术和目标蛋白快速分离系统对激光照射前后胚胎基因表达产物- - 细胞膜蛋白和细胞质可溶性蛋白质表达谱分别进行差异分析，并采用质谱分析等技术进一步研究其理化性质，确定光敏蛋白特征；限制性酶切和电泳技术对比研究细胞核DNA和线粒体DNA，检测其损伤情况；提取细胞总mRNA通过荧光定量PCR和ESTs技术获得差异表达片段，进一步克隆差异表达的基因，并且结合生物信息学分析转录谱，确定与信号传导相关的基因。结合国内外有关激光作用和信号转导的研究结果，提出激光信号转导途径的理论模型。为认识生物在进化过程中，光对其物种演化、变异所起的重要作用和生物在特定光（物理环境）条件下的遗传适应性以及胚胎发生过程中的分子机理积累资料，为激光生物学研究提供新的生长点。