21羟化酶缺陷症基因突变的功能学研究

最近本项目组通过对三个21-羟化酶缺陷症家系进行基因测序分析，发现了一个国际、国内尚未见报道的新突变（外显子10第459位密码子CCC→CAC，导致Pro→His，相关文献已发表）和一个稀有突变（外显子10第483位密码子：CGG→TGG，导致Arg→Trp国外仅有一例报道）。同时采用扩增引进限制性酶切位点（PCR- ACRS）的方法对正常人进行Pro459His的筛查，证实其为突变而非基因多态。明确这两个突变对酶活性的影响非常必要，这可进一步丰富21羟化酶缺陷症基因突变的基因谱，为21-羟化酶缺陷症患者提供新的诊断依据，也将为遗传咨询、产前诊断和新生儿筛查提供新的重要依据。本研究拟通过定点诱导突变、构建携带突变基因的表达载体并转入细胞进行表达、检测酶活性的方法，对这两个突变进行功能学研究，并进行基因型-表现型关联分析。