miR-20a与NF-κB反馈激活在胃癌化疗耐药中的机制研究

Sustained NF-κB activation is an important mechanism of tumor resistance to chemotherapy, efficacy of its blocker in hematological malignancies is encouraging, but in gastric cancer and other solid tumors it is still not quite exact, so it is necessary to further explore the mechanism of sustained activation of NF-κB in gastric cancer. Our previous studies have shown that: 1st, miR-20a up-regulation and NF-κB activation were closely associated with gastric cancer drug resistance; 2nd, silence of miR-20a could inhibit NF-κB activation and reverse the phenotype of drug resistant gastric cancer cells; 3rd, inhibition of NF-κB could decrease miR-20a expression; 4th, NF-κB inhibitors such as CYLD, PTEN and NFKBIB were direct target genes of miR-20a. Therefore, we present hypothesis that positive feedback loops of miR-20a→CYLD/PTEN/NFKBIB→NF-κB→miR-20a is an important mechanism for NF-κB sustained activation in drug resistant gastric cancer cells. We intend to verify this hypothesis via in vitro and in vivo experiments based on drug resistant gastric cancer cells, tumor-bearing mice and specimens of patients with gastric cancer. Our research would elucidate the key role of miR-20a and NF-κB co-regulation in drug resistant gastric cancer and provide theoretical information for screening key targets to reverse chemotherapy resistance.

NF-κB持续激活是肿瘤化疗耐药的重要机制，其阻断剂在血液肿瘤中疗效令人鼓舞，但对胃癌等实体瘤的疗效尚不确切，有必要继续探索胃癌中NF-κB持续激活的机制。我们前期研究表明：①miR-20a上调、NF-κB激活与胃癌耐药相关；②沉默miR-20a可抑制NF-κB活化并逆转胃癌耐药细胞表型；③抑制NF-κB可下调miR-20a表达；④NF-κB抑制因子CYLD、PTEN及NFKBIB均是miR-20a的靶基因，故我们认为胃癌耐药细胞中存在miR-20a→CYLD/PTEN/NFKBIB→NF-κB→miR-20a的正反馈通路，是NF-κB持续激活并调控胃癌耐药的重要机制。本项目拟以胃癌耐药细胞、荷瘤小鼠、胃癌患者标本为研究对象，应用体内外功能学实验从分子、细胞和整体三个层面对此假说进行验证，阐明miR-20a、NF-κB相互调控在胃癌耐药中的关键作用，并为筛选关键靶点逆转耐药提供理论依据。

MicroRNA （miRNA）是基因转录后调控的重要分子，其调控方式是非编码基因调控的重要类型。miRNA在细胞生长、分化、增殖、凋亡等病理生理过程中发挥广泛而重要的调节作用。肿瘤中，miRNA通常以癌基因或抑癌基因的角色参与肿瘤的发生发展、预后、治疗以及耐药等过程中的机制。.胃癌化疗耐药是制约进展期胃癌疗效进一步提高的关键因素。尽管以往的研究已从多层次、多角度对胃癌的耐药机制进行了剖析，然而由于耐药产生机制的复杂性，目前仍然不能完全阐明胃癌耐药产生的全部机制，因此有必要对胃癌耐药的机制进行新的探索。.本课题组发现miR-20a在胃癌组织和细胞中均呈显著高表达，同时在胃癌顺铂耐药细胞中进一步表达增高，并可通过靶向调控CYLD/NFKBIB，激活NF-κB信号通路从而介导胃癌细胞对顺铂的耐药。同时课题组还发现miR-503在胃癌组织和细胞中均呈显著低表达，在胃癌顺铂耐药细胞中进一步表达降低，并可通过靶向调控IGF1R/IRS1信号通路节点蛋白，如：IGF1R及BCL2进而影响胃癌细胞对顺铂的治疗敏感性。这部分内容阐述了miRNA在胃癌耐药中的可能的部分机制，为将来更好地研究耐药机制及可能的逆转耐药做好铺垫。.胃癌的发生发展是一个复杂的，多步骤，多因素的过程。其中环境易感因素，基因遗传，表观遗传学都起了很大作用。miRNA可以通过与癌基因以及抑癌基因等之间复杂的相互作用从而影响胃癌的发生与发展。课题组发现过表达胃癌细胞系中miR-34a可靶向抑制Fra-1的表达，从而抑制胃癌细胞的侵袭转移增殖能力，影响胃癌进展。.目前临床工作中，对于肿瘤的预后评判还是主要建立在肿瘤的分期，CT评估，肿瘤标志物等，这些传统的预后指标的敏感性及特异性较低，且使用具有一定的局限性。因此寻找具有高敏感性及特异性，方便易于获取的预后指标用以指示预后信息，以利于对病人选择更合适的治疗手段将显得更具意义。课题组通过荟萃分析发现了Smad4可能用于预测肿瘤病人的预后标志物。.总之，课题组这些研究将为揭示肿瘤多方面的机制打下基础，并为将来进一步可能服务于临床上提供依据。